[发明专利]一种用于白细胞介素SERS检测的免疫生物芯片及其制备方法

权利要求书

1.一种用于白细胞介素SERS检测的免疫生物芯片，其特征在于，该芯片包括位于上层的SERS探针和位于下层的免疫基底，所述SERS探针是修饰4-MBA和IL-6抗体的AuNPs，所述免疫基底是表面修饰3-MPA、IL-6抗体和IL-6的AgNT免疫基底。

2.一种如权利要求1所述的用于白细胞介素SERS检测的免疫生物芯片的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)SERS探针的制备：在AuNPs表面修饰4-MBA，活化后再修饰上IL-6抗体，得到4-MBA/AuNPs/Antibody_IL-6SERS探针；

(2)AgNT免疫基底的制备：在AgNT基底表面修饰3-MPA，活化后再修饰上IL-6抗体，然后识别不同浓度的IL-6，得到3-MPA/AgNT/Antibody_IL-6/IL-6免疫基底；

(3)免疫生物芯片的制备：将步骤(2)获得的3-MPA/AgNT/Antibody_IL-6/IL-6免疫基底浸入到步骤(1)得到的4-MBA/AuNPs/Antibody_IL-6SERS探针中，孵育30min，接着用超纯水清洗掉未连接的SERS探针，自然干燥后得到用于白细胞介素SERS检测的免疫生物芯片。

3.根据权利要求2所述的一种用于白细胞介素SERS检测的免疫生物芯片的制备方法，其特征在于，步骤(1)的具体步骤如下：取1mL 100nm的金溶胶于离心管中，离心洗涤后重新分散在500μL超纯水中形成AuNPs溶液，然后与浓度为10^-4M的4-MBA溶液混合并在4℃下静置12h，在AuNPs表面修饰上-COOH，所述AuNPs溶液与4-MBA溶液的体积比为1：1；离心洗涤后活化-COOH，向活化后的4-MBA/AuNPs溶液中加入浓度为2mg/mL的IL-6抗体，所述4-MBA/AuNPs溶液与IL-6抗体的体积比为200：1，于4℃条件下孵育30min，离心洗涤后重新分散在超纯水中，得到4-MBA/AuNPs/Antibody_IL-6SERS探针。

4.根据权利要求3所述的一种用于白细胞介素SERS检测的免疫生物芯片的制备方法，其特征在于，活化-COOH的方法为：在200μL 4-MBA/AuNPs溶液中加入浓度为34mM的EDC溶液和浓度为2mM的NHS溶液，于4℃下反应30min，离心后重新分散在200μL超纯水中；所述EDC溶液和NHS溶液分别与4-MBA/AuNPs溶液的体积比为1：100。

5.根据权利要求2所述的一种用于白细胞介素SERS检测的免疫生物芯片的制备方法，其特征在于，步骤(2)的具体步骤如下：将AgNT基底浸入到浓度为10^-7M的3-MPA溶液中并在4℃下静置12h，利用Ag-S键的连接将3-MPA固载在AgNT基底上，用超纯水清洗掉未连接的3-MPA；在3-MPA/AgNT中加入200μL浓度为0.34mM的EDC溶液和2μL浓度为2mM的NHS溶液，于4℃下反应30min活化-COOH，用超纯水清洗得到活化后的3-MPA/AgNT；向活化后的3-MPA/AgNT中加入200μL浓度为10μg/mL的IL-6抗体，于4℃下孵育30min，用超纯水清洗得到3-MPA/AgNT/Antibody_IL-6基底；将不同浓度的IL-6标准溶液与3-MPA/AgNT/Antibody_IL-6基底在4℃下孵育30min，得到3-MPA/AgNT/Antibody_IL-6/IL-6免疫基底。