[发明专利]一种柞蚕蛹ACE抑制蛋白肽的制备方法在审
| 申请号： | 202310047699.6 | 申请日： | 2023-01-31 |
| 公开（公告）号： | CN116287072A | 公开（公告）日： | 2023-06-23 |
| 发明（设计）人： | 王刚;赵艺芯;郭明珠 | 申请（专利权）人： | 吉林农业大学 |
| 主分类号： | C12P21/06 | 分类号： | C12P21/06;C07K1/34;C12N9/48;A23L33/18;A61K38/01;A61P9/12;A61P39/06 |
| 代理公司： | 重庆晶智汇知识产权代理事务所(普通合伙) 50229 | 代理人： | 李靖 |
| 地址： | 130118 吉*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 柞蚕 ace 抑制 蛋白 制备 方法 | ||
1.一种柞蚕蛹ACE抑制蛋白肽的制备方法，其特征在于：以柞蚕蛹蛋白粉为原料加入pH为10.5的缓冲液制备成蛋白液，先采用碱性蛋白酶进行第一步水解，然后采用胃蛋白酶进行第二步水解。
2.如权利要求1所述的一种柞蚕蛹ACE抑制蛋白肽的制备方法，其特征在于：所述第一步酶解中蛋白液浓度为3.5wt.%，添加酶活为50U/mg的碱性蛋白酶，添加浓度为6.5wt.%，水解温度为50℃，添加超纯水后进行恒温水解4h。
3.如权利要求1所述的一种柞蚕蛹ACE抑制蛋白肽的制备方法，其特征在于：所述第二步水解是将第一步水解后的酶解液pH调节至1.5-3.5，添加酶活为30U/mg的胃蛋白酶，添加浓度为1-3.5wt.%，在35-42℃下水解10-20min。
4.如权利要求1所述的一种柞蚕蛹ACE抑制蛋白肽的制备方法，其特征在于：在第二步水解之前，在第一步水解得到的酶解液中加入硫酸钠，添加浓度为0.4-0.8wt.%加热至40-50℃，保温30-60min。
5.一种柞蚕蛹ACE抑制蛋白肽的制备方法，其特征在于，按照如下步骤进行：
（1）以柞蚕蛹蛋白粉为原料加入pH为10.5的缓冲液制备成浓度为3.5wt.%的蛋白液，添加酶活为250U/mg的碱性蛋白酶，使其浓度达到6.5wt.%，水解温度为50℃，进行第一步水解，水解时间为4h；
（2）将步骤（1）水解后的酶解液pH调节至1.5-3.5，添加酶活为30U/mg的胃蛋白酶，添加浓度为1-3.5wt.%，在35-42℃下进行第二步水解，水解时间为10-20min；
（3）将水解后的酶解液在1000rpm下离心15min，取上清液，使用3kDa的滤膜进行超滤，得到分子量小于3kDa的柞蚕蛹蛋白肽溶液，然后进行干冻得到蚕蛹ACE抑制肽粉。
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