[发明专利]一种铜绿假单胞菌噬菌体pPA-3099-2aT.2及其应用和制剂

说明书

本申请提供了一种铜绿假单胞菌噬菌体pPA‑3099‑2aT.2及其应用和制剂，铜绿假单胞菌噬菌体pPA‑3099‑2aT.2的分类学命名为Pseudomonas aeruginosa phage pPA‑3099‑2aT.2，噬菌体保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，保藏地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏编号为：GDMCC No:62850‑B1。本申请的噬菌体能快速杀死培养基中的宿主菌，且毒副作用小，安全性高，温度、酸碱耐受范围比较广且具有良好的亲水性，易制成喷洒剂和注射剂，对铜绿假单胞菌的增殖有良好的抑制、杀灭作用，对感染多重耐药铜绿假单胞菌的动物有很好的治疗和保护作用。

技术领域

本发明涉及微生物领域，更具体地，涉及铜绿假单胞菌噬菌体及其应用和制剂。

背景技术

铜绿假单胞菌 ( Pseudomonas aeruginosa，PA)，是假单胞菌科非发酵、需氧革兰阴性杆菌。在自然界中广泛存在并能耐受恶劣环境，其致病性较强，可引起多种疾病如囊性纤维化、肺炎、尿路感染、外耳炎、伤口感染、骨和关节感染、菌血症和全身性感染等，同时也是囊性纤维化患者的主要致死原因，严重感染时可危及患者生命。国际医院感染控制联盟对全世界703个重症监护病房进行了监测，发现铜绿假单胞菌是引起院内感染的最主要病原菌，其次是鲍曼不动杆菌和肺炎克雷伯氏菌。根据2020年全国细菌耐药监测报告显示，在临床分离的细菌中，铜绿假单胞菌分离数量排名第三(12.2%)，由此可见，铜绿假单胞菌的感染是不容忽视的问题。近年来，多重耐药和广泛耐药铜绿假单胞菌的出现，给临床治疗带来很大的挑战，同时也成为全球性公共卫生问题。

噬菌体是一种可以感染并杀死细菌的病毒，由Twort于1915年发现，并在20世纪20年代早期被成功地用于治疗动物和人类细菌感染。20世纪初进行的噬菌体研究大多集中在治疗细菌感染方面，但随着抗生素的出现逐渐弱化了这一热点研究。近年来，随着抗生素耐药菌的广泛出现，噬菌体再次成为研究焦点。噬菌体能高效、特异地裂解宿主菌株至其死亡并释放子代，是一种高生物安全性的天然杀菌物。利用噬菌体遏制耐药细菌传播和治疗骨关节等深部细菌感染具有十分广阔的应用前景，例如，Karlis Racenis等人利用噬菌体鸡尾酒联合抗生素使复发性多重药耐药（MDR）铜绿假单胞菌患者股骨骨髓炎股骨近端骨段铜绿假单胞菌根除，避免截肢。T. Ferry等为抗生素治疗菌血症出现急性肾损伤患者提供为期21d的噬菌体治疗，结果病情好转且无与噬菌体治疗相关不良反应。同时，噬菌体也是微生态中的重要组成成分，在人体以及动物肠道，土壤环境，水体环境中有各自微生态系统存在，在调节微生态系统的功能上起到重要作用。

发明内容

本发明针对上述技术问题，提供一株铜绿假单胞菌噬菌体及其对多耐药铜绿假单胞菌抑制、杀灭的应用，旨为铜绿假单胞菌的感染提供新的治疗方案，以及对铜绿假单胞菌造成的环境和饲料等污染提供潜在的新型消毒手段。

本申请提供了一种铜绿假单胞菌噬菌体pPA-3099-2aT.2，分类学命名为Pseudomonas aeruginosa phage pPA-3099-2aT.2，噬菌体保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，保藏地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏编号为：GDMCC No:62850-B1。

本申请提供了一种制剂，包括上述铜绿假单胞菌噬菌体pPA-3099-2aT.2。

本申请还提供了铜绿假单胞菌噬菌体pPA-3099-2aT.2在制备防治铜绿假单胞菌感染的制剂中的应用。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

(1) 铜绿假单胞菌噬菌体pPA-3099-2aT.2是宽宿主谱噬菌体，该噬菌体对购自优宜邦生物科技（上海）有限公司的18株铜绿假单胞菌（货号见表1）具备很强的消杀效果，抗菌谱较广，可应用于制备防治多重耐药铜绿假单胞菌的药物；