[发明专利]一种循环肿瘤细胞富集探针、其制备方法及在构建诊断传感器中的应用

权利要求书

1.一种循环肿瘤细胞富集探针的制备方法，其特征在于，

(1)将钼酸铵溶解在硝酸稀释液中，经高温裂解、离心、洗涤、干燥合成MoO₃纳米棒；其中，钼酸铵与硝酸的质量体积比为(0.5-1.5)g：(8-16)mL；

(2)室温下，将步骤(1)制得的MoO₃纳米棒作为模板分散在水中，加入吡咯单体，搅拌，形成溶液A；再将HAuCl₄和无水氯化铁溶解在水中形成溶液B；其中，溶液A中MoO₃纳米棒、吡咯单体和水的比例为(30-70)mg：(60-140)μL：(30-60)mL；溶液B中HAuCl₄、无水氯化铁和水的比例为(0.6-1.4)mL：(18-42)mg：(3-7)mL；

(3)常温下将溶液B逐滴加入到溶液A中，继续反应，氮气保护下，慢慢滴加浓氨水，进一步反应，磁分离、洗涤、干燥，得PPy@Fe₃O₄-Au空心纳米管；

(4)将步骤(3)制得的PPy@Fe₃O₄-Au空心纳米管分散在缓冲液中，制得悬浮液浓度为0.5-1.5mg/mL；向悬浮液中加入巯基修饰的核酸适配体或特异性抗体，两者比例为(0.5-1.5mg/mL):(0.6-1.4μM)，磁分离，制得PPy@Fe₃O₄-Au-巯基修饰的核酸适配体或特异性抗体复合物。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，钼酸铵与硝酸的质量体积比为(0.9-1.1)g：(11-13)mL。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)中，溶液A和溶液B的混合比例以MoO₃纳米棒和无水氯化铁的质量比为(30-70)：(18-42)计。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)中，浓氨水的添加比例，以HAuCl₄和浓氨水的体积比为(0.6-1.4)：(3-7)。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(4)中，所述的核酸适配体选自NC3S或SYL3。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(4)中，所述的特异性抗体选自N-Cadherin或EpCAM抗体。

7.如权利要求1所述方法制备获得的循环肿瘤细胞富集探针；所述探针为PPy@Fe₃O₄-Au空心管状磁性纳米复合物；该探针加入到相应的细胞稀释液中，室温搅拌、磁分离、洗涤、重新分散在缓冲溶液中完成细胞的富集；所述细胞包括检测上皮型、间质型或双靶捕获全型CTC细胞中的一种。

8.如权利要求7所述的探针在构建用于循环肿瘤细胞的诊断传感器中的应用，其特征在于：所述应用为基于PPy@Fe3O4-Au空心管状磁性纳米复合物探针富集目标物，GO@HMPB-Pt纳米复合物固载电化学发光体Luminol构建电化学免疫发光传感器，用以检测循环肿瘤细胞。