[发明专利]一种合成植物精油关键组分的重组菌及其构建方法和应用

权利要求书

1.一种合成植物精油关键组分的重组菌，其特征在于，所述重组菌中含有外源基因；所述外源基因包括萜类合成酶、细胞色素P450以及短链脱氢酶的基因；

所述植物精油关键组分包括百里香酚和香芹酚。

2.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述萜类合成酶、细胞色素P450以及短链脱氢酶的基因来源于百里香。

3.根据权利要求2所述的重组菌，其特征在于，所述重组菌的出发菌为酵母菌；

优选地，所述酵母菌包括解脂耶氏酵母pO1f。

4.如权利要求1-3任一项所述的重组菌的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：将经过密码子优化后的萜类合成酶、细胞色素P450以及短链脱氢酶的基因连接到表达载体上，然后将获得的重组表达载体导入至出发菌中，即获得所述重组菌。

5.根据权利要求4所述的重组菌的构建方法，其特征在于，所述萜类合成酶包括TvTPS2，密码子优化后的TvTPS2的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

6.根据权利要求5所述的重组菌的构建方法，其特征在于，所述细胞色素P450包括TvCYP71D507-T，密码子优化后的TvCYP71D507-T的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

7.根据权利要求6所述的重组菌的构建方法，其特征在于，所述短链脱氢酶包括TvSDR1-T，密码子优化后的TvSDR1-T的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

8.根据权利要求4所述的重组菌的构建方法，其特征在于，所述表达载体包括pCfB4586质粒、pCfB4778质粒和pCfB5791质粒；

优选地，所述萜类合成酶、细胞色素P450以及短链脱氢酶的基因中任意两个基因连接在同一表达载体上。

9.如权利要求1-3任一项所述的重组菌或权利要求4-8任一项所述的重组菌的构建方法获得的重组菌的应用，其特征在于，所述重组菌通过发酵生产百里香酚和香芹酚。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述重组菌发酵生产百里香酚和香芹酚的步骤包括：活化重组菌，然后将其接入液体培养基中，培养后将获取的菌液经过真空冷冻干燥、研磨，获得含有百里香酚和香芹酚的菌粉；

优选地，所述液体培养基包括酵母浸出粉胨葡萄糖培养基；

优选地，所述重组菌培养条件为：在25-30℃，180-400rpm下培养24-96h。