[发明专利]一种肝癌检测标志物及检测肝癌的试剂盒

说明书

本发明涉及肝癌体外诊断产品技术领域。本发明提供了一种肝癌检测标志物及检测肝癌的试剂盒，所述肝癌检测标志物为miR‑3677‑3p。本发明利用该标志物的引物制作了试剂盒，本发明的试剂盒和现有试剂盒对比，采用的是QPCR技术，包含SYBRGreenⅠ法和TaqMan探针法。不同于传统的内参照法、竞争法和PCR‑ELISA法，并且采用新发现位点miRNA‑3677‑3p进行检测，提高确诊肝癌的精确性。具有价格低廉、灵敏度高、特异性强、扩增效率高等优点。对于肝癌的检验有重要的临床指导意义。并且对引物序列进行了更新。

技术领域

本发明涉及肝癌体外诊断产品技术领域，尤其涉及一种肝癌检测标志物及检测肝癌的试剂盒。

背景技术

市面上的肝癌试剂盒主要运用酶联免疫吸附法和肝癌细胞活性氧检测法测定。酶联免疫吸附法(ELISA)，可以将可溶性的抗原或抗体(在肝癌检测中多为甲胎蛋白AFP)结合到聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法。定性反应在白色背景下肉眼读取结果；定量反应用酶标仪读取。肝癌细胞活性氧检测法，活性氧ROS可以激活癌症通路。利用氧化还原活性的荧光探针检测人肝癌细胞细胞器中活性氧的水平动态变化。可以用微板分光光度计定量检测荧光强度来得到数据。

市面上现今最有效的是甲胎蛋白的检测。然而市场上ELISA试剂盒的价格普遍高昂。并且有研究表明血清甲胎蛋白易出现假阴性，造成漏诊。而miRNA作为靶点检测的新技术更加精准，并且技术成本低，价格低，操作方便。此外，ROS检测利用的氧化还原活性的荧光探针具有选择性差，而且反应需要催化剂，耗材多，细胞内pH值、过氧化剂和细胞色素C会影响检测结果，荧光探针在光照条件下可发生自氧化等缺点。

发明内容

本发明的目的在于提供一种肝癌检测标志物及检测肝癌的试剂盒，提高确诊肝癌的精确性。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种肝癌检测标志物，所述肝癌检测标志物为miR-3677-3p。

本发明还提供了一种检测标志物miR-3677-3p的引物对，所述引物对包括正向引物和反向引物，所述正向引物的序列如SEQ ID NO.1所示，所述反向引物的序列如SEQ IDNO.2所示。

本发明还提供了一种检测肝癌的试剂盒，所述试剂盒中包含序列为SEQ ID NO.1～2的引物对。

本发明提供了一种肝癌检测标志物及检测肝癌的试剂盒，所述肝癌检测标志物为miR-3677-3p。本发明利用该标志物的引物制作了试剂盒，本发明的试剂盒和现有试剂盒对比，采用的是QPCR技术，包含SYBRGreenⅠ法和TaqMan探针法。不同于传统的内参照法、竞争法和PCR-ELISA法，并且采用新发现位点miRNA-3677-3p进行检测，提高确诊肝癌的精确性。具有价格低廉、灵敏度高、特异性强、扩增效率高等优点。对于肝癌的检验有重要的临床指导意义。并且引物序列进行了更新。

具体实施方式

本发明提供了一种肝癌检测标志物，所述肝癌检测标志物为miR-3677-3p。

本发明还提供了一种检测标志物miR-3677-3p的引物对，所述引物对包括正向引物和反向引物，所述正向引物的序列如SEQ ID NO.1所示，所述反向引物的序列如SEQ IDNO.2所示。

本发明还提供了一种检测肝癌的试剂盒，所述试剂盒中包含序列为SEQ ID NO.1～2的引物对。

下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。

实施例1试剂准备

按照表1所示准备所用的试剂。

表1