[发明专利]一种基于体外发酵模型评价肠道菌群色氨酸代谢的方法及其应用在审
申请号: | 202310003868.6 | 申请日: | 2023-01-03 |
公开(公告)号: | CN116047080A | 公开(公告)日: | 2023-05-02 |
发明(设计)人: | 王鸿超;陆文伟;赵建新;何袁;高文玉;王心怡 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;C12Q1/689;C12Q1/6869;G01N30/06;G01N30/72 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 林娟 |
地址: | 214122 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 体外 发酵 模型 评价 肠道 色氨酸 代谢 方法 及其 应用 | ||
1.一种体外发酵模型评价膳食多糖对肠道菌群色氨酸代谢影响的方法,其特征在于,所述方法为将新鲜粪便预处理后,将粪便匀浆液接种于含有膳食多糖的基础培养基中,厌氧发酵,离心,测定上清液中色氨酸代谢产物以及沉淀中肠道菌群的多样性。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述预处理为将新鲜粪便与缓冲液按体积比混合后,去除大颗粒,制得粪便匀浆液。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述缓冲液为含有半胱氨酸并去除氧气的磷酸缓冲液。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,将粪便匀浆液按照体积比10%~30%接种于含有膳食多糖的基础培养基中。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述厌氧发酵的条件为35~38℃厌氧培养20~30h。
6.根据权利要求1或4所述的方法,其特征在于,所述基础培养基包括胰蛋白胨4~6g/L,大豆蛋白胨2.5~3.5g/L,蛋白胨4~6g/L,消化血清粉8~12g/L,酵母浸膏2~3g/L,牛肉浸膏2~3g/L,肝脏浸膏1~1.5g/L,膳食多糖4~6g/L,L-色氨酸0.2g/L,L-半胱氨酸0.3g/L,硫代乙醇酸钠0.3g/L,L-精氨酸1.0g/L,维生素K4~6mg/L,血红素8~12mg/L,磷酸二氢钾2~3g/L,氯化钠2.5~3.5g/L。
7.根据权利要求1~6任一所述的方法,其特征在于,所述膳食多糖选自灵芝多糖子实体、黄芪多糖、燕麦葡萄糖、灰树花多糖、灰树花多糖、蛹虫草多糖子实体、桑黄多糖、白桦茸多糖、褐藻多糖、金针菇多糖、氨基葡聚糖、枸杞多糖、姬松茸多糖、树舌灵芝多糖、大枣多糖、猴头菇多糖、香菇多糖、山药多糖、银耳多糖、白耙齿菌多糖、白耙齿菌多糖、木耳多糖、黄精多糖或茯苓多糖中至少一种。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述沉淀中肠道菌群的多样性的测定方法为通过提取沉淀菌泥的基因组,进行16S rRNA测序。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,采用液相色谱-质谱联用分析法检测色氨酸代谢产物。
10.根据权利要求1或9所述的方法,其特征在于,所述色氨酸代谢产物包括犬尿氨酸、吲哚丙酸、吲哚乙酸、吲哚乳酸、吲哚3甲醛、色胺和色氨酸。
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