[发明专利]LncRNA-ENST00000446135在制备预测AML预后试剂盒中的应用

说明书

本发明属于生物技术领域，具体涉及LncRNA‑ENST00000446135在制备预测AML预后试剂盒中的应用。本发明首次发现AML患者骨髓中LncRNA‑ENST00000446135的表达水平与AML患者的预后相关，当其表达水平CT值≥0.655时，指示AML患者预后良好；当其表达水平CT值0.655时，指示AML患者预后不良。本发明试剂盒对AML患者的预后预测效果较好，具有广阔的临床应用前景。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及LncRNA-ENST00000446135在制备预测AML预后试剂盒中的应用。

背景技术

急性髓性白血病(AML)是一组具有各种遗传异常的造血系统恶性肿瘤，包括染色体易位和/或体细胞突变，其主要造成骨髓祖细胞的异常增殖、分化或存活。尽管多种治疗方法如化疗和干细胞移植等常用于AML的治疗，但其预后仍不容乐观，尤其是化疗耐药、转移及复发的产生对预后不良产生不容忽视的重要作用。目前多项研究表明，表观遗传失调对AML的作用越来越受重视，除了乙酰化及甲基化修饰，非编码RNA的调节也发挥重要作用。

已有研究表明，LncRNA在分子遗传水平和细胞水平具有相应的功能，包括参与基因组印记、剂量补偿效应、染色质的修饰、细胞分化、细胞周期的调控、细胞内物质的运输以及热休克反应等。如HOXA-AS2在体外和体内能够促进ADR细胞增殖并抑制细胞凋亡导致AML的发生，同时其能负调节ADR细胞中miR-520c-3p的表达来增强AML的化疗药物耐药。LncRNAANRIL通过AdipoR1/AMPK/SIRT1的葡萄糖代谢途径促进恶性细胞存活和细胞葡萄糖代谢以加速AML进展，其可作为AML治疗中潜在的预后标志物和治疗靶标。然而目前用于AML预后预测的标志物对AML预后指示的准确度不高，因此，开发一种具有更优指示AML预后的标志物对于AML更准确的预后具有重要意义。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明目的在于提供LncRNA-ENST00000446135在制备预测AML预后试剂盒中的应用，本发明以LncRNA-ENST00000446135作为AML预后预测标志物，对于AML的预后预测具有较高的准确度。

基于上述目的，本发明采用的技术方案如下：

第一方面，本发明提供LncRNA-ENST00000446135在制备急性髓性白血病预后预测试剂盒中的应用。

LncRNA-ENST00000446135的核苷序列如SEQ ID NO.1所示，本发明通过对正常细胞和AML细胞的RNA-seq的差异性分析发现在AML细胞中LncRNA-ENST00000446135的表达水平显著低于正常细胞，并且在AML患者的标本中得到验证，LncRNA-ENST00000446135在AML初诊及复发患者中异常低表达，但在化疗缓解及造血干细胞移植后该LncRNA能恢复正常表达，表明LncRNA-ENST00000446135是AML患者生存时间的独立影响因素，因此，LncRNA-ENST00000446135可作为AML患者预后预测标志物。

优选地，通过检测临床患者的骨髓中LncRNA-ENST00000446135的表达水平，结合判定标准，从而预测AML预后。

优选地，上述判定标准如下：

当LncRNA-ENST00000446135的表达水平CT值≥0.655时，指示AML患者预后良好；

当LncRNA-ENST0000044613的表达水平CT值0.655时，指示AML患者预后不良。

基于本发明判定标准，能够更为准确指示AML患者的预后。

第二方面，本发明提供一种用于急性髓性白血病预后预测试剂盒，所述试剂盒包括用于扩增LncRNA-ENST00000446135的引物；所述引物如下：