[发明专利]基因组合及其表达载体和用途

说明书

本发明属于基因治疗或生物基因技术领域，尤其涉及一种基因组合及其表达载体和用途。所述基因组合用于在鼻部细胞内存在并表达；包括：U6启动子以及下游的sgRNA基因和串联的抑癌基因，所述sgRNA基因以抑癌基因为靶基因；super hTERT启动子以及下游的dCas9基因和/或miniSaCas9基因，和串联的VP64基因；SPLUNC1启动子以及下游的artificial miRNA基因；其中，U6启动子、super hTERT启动子、dCas9基因、miniSaCas9基因、VP64基因、SPLUNC1启动子和artificial miRNA基因依次如SEQ ID NO.1‑7所示。U6启动子启动的sgRNA与super hTERT启动的dCas9‑VP64串联激活下游抑癌基因，如P53等，最终使鼻咽癌细胞凋亡，实现对鼻咽癌的治疗。

技术领域

本发明属于基因治疗或生物基因技术领域，尤其涉及一种基因组合及其表达载体和用途。

背景技术

随着针对肿瘤及癌症的特异性分子的靶向治疗策略逐渐发展，可以在最大程度上改善治疗效果。与放化疗相比，肿瘤的靶向治疗具有特异性强、副作用小的特点。然而，相对于其他常见的恶性肿瘤如肝癌和肺癌等，针对鼻咽癌的靶向治疗的研究起步较晚。

目前，靶向表皮生长因子受体（EGFR）和血管内皮生长因子（VEGF）的药物在铂类药物抵抗的鼻咽癌患者中已显现出临床疗效。但临床上仍缺少有效的鼻咽癌靶向治疗策略。

发明内容

本申请提供了一种基因组合及其表达载体和用途，以提供一种有效且精确的靶向治疗鼻咽癌的方式。

第一方面，本申请提供了一种基因组合，所述基因组合用于在鼻部细胞内存在并表达；包括：

U6启动子以及下游的sgRNA基因和串联的抑癌基因，所述sgRNA基因以抑癌基因为靶基因；

super hTERT启动子以及下游的dCas9基因和/或miniSaCas9基因，和串联的VP64基因；

SPLUNC1启动子以及下游的artificial miRNA基因；

其中，U6启动子、super hTERT启动子、dCas9基因、miniSaCas9基因、VP64基因、SPLUNC1启动子和artificial miRNA基因依次如SEQ ID NO.1-7所示。

可选的，所述抑癌基因选自P53、P21、BAX、 Caspas3、Caspas8。

第二方面，本申请提供了表达载体，包含权利要求1所述的基因组合。

可选的，表达载体包括pGPU6质粒、GFP质粒、Neo质粒中至少一种。

第三方面，本申请提供了一种基因组合在制备抗鼻咽癌药物中的用途，所述基因组合用于在鼻部细胞内存在并表达；包括：

U6启动子以及下游的sgRNA基因和串联的抑癌基因，所述sgRNA基因以抑癌基因为靶基因；

super hTERT启动子以及下游的dCas9基因和/或miniSaCas9基因，和串联的VP64基因；

SPLUNC1启动子以及下游的artificial miRNA基因；

其中，U6启动子、super hTERT启动子、dCas9基因、miniSaCas9基因、VP64基因、SPLUNC1启动子和artificial miRNA基因依次如SEQ ID NO.1-7所示。

可选的，抑癌基因的表达至少有2倍的差异。

可选的，表示差异性调节的p值小于0.05。

第四方面，本申请提供了一种表达载体在制备抗鼻咽癌药物中的用途，所述表达载体包括下列基因组合，所述基因组合用于在鼻部细胞内存在并表达；包括：

U6启动子以及下游的sgRNA基因和串联的抑癌基因，所述sgRNA基因以抑癌基因为靶基因；