[发明专利]一种重组球孢白僵菌及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种重组球孢白僵菌，其特征在于，所述重组球孢白僵菌能够表达寄生蜂毒液蛋白。

2.根据权利要求1所述的重组球孢白僵菌，其特征在于，所述重组球孢白僵菌整合有外源的编码寄生蜂毒液蛋白的基因，所述编码寄生蜂毒液蛋白的基因为如下任一所述的核苷酸序列：

a1)SEQ ID NO.1第67-1449位的核苷酸序列；

b1)SEQ ID NO.2第67-1449位的核苷酸序列；

c1)上述a1)或b1)的互补序列；

d1)由于遗传密码简并性而从SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2的核苷酸序列衍生的多核苷酸。

3.根据权利要求2所述的重组球孢白僵菌，其特征在于，所述重组球孢白僵菌中在外源的编码寄生蜂毒液蛋白的基因前整合有内源的编码球孢白僵菌几丁质酶chit1信号肽的基因，所述编码球孢白僵菌几丁质酶chit1信号肽的基因如下任一所述的核苷酸序列：

a2)SEQ ID NO.3的核苷酸序列；

b2)上述a2)的互补序列；

c2)由于遗传密码简并性而从SEQ ID NO.3的核苷酸序列衍生的多核苷酸。

4.一种重组球孢白僵菌，其特征在于，所述重组球孢白僵菌的保藏编号为CGMCCNO.23043。

5.一种杀虫剂，其特征在于，所述杀虫剂包括权利要求1-4任一所述的重组球孢白僵菌，或其后代、或其产生的分生孢子或其产生的菌丝体或它们之间的任意组合；优选地，还包括农药学上可接受的载体。

6.根据权利要求5所述的杀虫剂，其特征在于，所述杀虫剂用于防治棉铃虫和/或草地贪夜蛾。

7.权利要求1-4任一所述的重组球孢白僵菌、或所述重组球孢白僵菌的后代、或其产生的分生孢子或其产生的菌丝体、或它们之间的任意组合在制备杀虫剂中的应用。

8.一种重组球孢白僵菌的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将编码球孢白僵菌几丁质酶chit1信号肽的基因和编码寄生蜂毒液蛋白的基因可操作性地导入球孢白僵菌中。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述导入是通过农杆菌介导法进行的。

10.一种杀虫的方法，其特征在于，包括施用权利要求1-4任一所述的重组球孢白僵菌、或所述重组球孢白僵菌的后代、或其产生的分生孢子或其产生的菌丝体或它们之间的任意组合，或权利要求5或6任一所述的杀虫剂，或由权利要求8或9所述制备方法制备的重组球孢白僵菌的步骤。