[发明专利]一种显色染料和制备方法及其用途

说明书

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种显色染料和制备方法及其用途，本发明提供的显色染料，包括：3,3'‑二氨基联苯胺四盐酸盐和萘或其类似物或其衍生物；本发明通过研究发现，将3,3'‑二氨基联苯胺四盐酸盐和萘或其类似物或其衍生物组合，可以将DAB染料的显色颜色由棕色变为黄色，增添了一种新的颜色选择，且该颜色的灵敏度和稳定性均不差于传统的DAB染色。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种显色染料和制备方法及其用途。

背景技术

DAB(3,3'-二氨基联苯胺四盐酸盐)显色试剂是免疫学、免疫组织化学等研究及检测领域常用的显色试剂，在临床和科研方面有着广泛应用。其显色原理是：过氧化物在过氧化物酶催化条件下发生化学反应，释放氧化状态氧，继而与显色试剂的无色供氢体发生氧化还原反应，生色物被氧化，形成棕黄色沉淀而定位于过氧化物酶活性的部位，显色充分后将标本及时脱水封固，其终产物可直接在光镜下观察。

目前，DAB显色试剂较常用的还是其传统颜色棕色，颜色选择较少，限制了其使用。

发明内容

因此，本发明要解决的技术问题在于提供一种显色染料和制备方法及其用途，所述显色试剂实现了DAB显色试剂的颜色改变，使得DAB的棕色变为黄色，增添了一种新的颜色选择，且该颜色的灵敏度和稳定性均不差于传统的DAB染色。

为此，本发明提供了如下的技术方案：

一种显色染料，包括：3,3'-二氨基联苯胺四盐酸盐和萘或其类似物或其衍生物。

可选的，萘或其类似物或其衍生物包括：

可选的，3,3'-二氨基联苯胺四盐酸盐浓度范围为0.3～5mg/mL，萘或其类似物或其衍生物的浓度范围为质量百分比0.02～0.04wt％；

可选的，还包括DAB缓冲液。

一种显色染料的制备方法，包括：采用3,3'-二氨基联苯胺四盐酸盐和萘或其类似物或其衍生物进行配制。

可选的，包括：

配制DAB缓冲液：过氧化氢的质量分数为0.02％～0.04％，咪唑的摩尔浓度为30mM～100mM，表面活性剂的摩尔浓度为30nM～60nM，pH为7.2～7.6；

配制DAB显色团浓缩液：将3,3'-二氨基联苯胺四盐酸盐溶解制得；

配制萘或其类似物或其衍生物浓缩液：将萘或其类似物或其衍生物溶解制得；

将DAB显色团浓缩液和萘或其类似物或其衍生物浓缩液使用DAB缓冲液进行稀释，使得获得混合液中，3,3'-二氨基联苯胺四盐酸盐终浓度为0.3～5mg/mL，萘或其类似物或其衍生物的质量分数为0.02～0.04wt％。

可选的，所述表面活性剂为EDTA和/或Tween20；

配制DAB显色团浓缩液：将3,3'-二氨基联苯胺四盐酸盐溶解于二甲基亚砜或Tris缓冲液制得；和/或

配制萘或其类似物或其衍生物浓缩液：将萘或其类似物或其衍生物溶解于N，N-二甲基甲酰胺中制得。

所述的显色染料在免疫组织化学或免疫印迹染色中的用途。

可选的，所述免疫组织化学染色包括多重的免疫组织化学染色。

可选的，所述多重的免疫组织化学染色包括明场免疫组化染色。

本发明技术方案，具有如下优点：