[发明专利]一种Diego血型基因分型的引物组、试剂盒及其检测方法

权利要求书

1.一种Diego血型基因分型的引物组，其特征在于，包括能够扩增SLC4A1基因中靶标位点为c.1694的引物对。

2.根据权利要求1所述的引物组，其特征在于，所述靶标位点为c.1694的引物对为靶标位点为c.1694G的引物对或/和靶标位点为c.1694GC的引物对。

3.根据权利要求2所述的引物组，其特征在于，所述扩增靶标位点为c.1694G的引物对，其上游引物序列如SEQ ID NO.1所示，其下游引物序列如SEQ ID NO.2所示；

所述扩增靶标位点为c.1694GC的引物对，其上游引物序列如SEQ IDNO.3所示，其下游引物序列如SEQ ID NO.4所示。

4.根据权利要求1-3任一项所述的引物组，其特征在于，还包括扩增SLC4A1基因中靶标位点为c.1972的引物对，优选为扩增靶标位点为c.1972G的引物对或/和靶标位点为c.1972GA的引物对。

5.根据权利要求4所述的引物组，其特征在于，所述扩增靶标位点为c.1972G的引物对中，其上游引物序列如SEQ ID NO.5所示，其下游引物序列如SEQ ID NO.6所示；

所述扩增靶标位点为c.1972GA的引物对中，其上游引物序列如SEQ ID NO.7所示，其下游引物序列如SEQ ID NO.8所示。

6.根据权利要求1-5任一项所述的引物组，其特征在于，还包括扩增SLC4A1基因中靶标位点为c.2561C或/和c.2561CT的引物对；

优选的，所述扩增靶标位点为c.2561C的引物对中，其上游引物序列如SEQ ID NO.9所示，其下游引物序列如SEQ ID NO.10所示；

所述扩增靶标位点为c.2561CT的引物对中，其上游引物序列如SEQ ID NO.11所示，其下游引物序列如SEQ ID NO.12所示。

7.一种试剂盒，其特征在于，包括权利要求1-6任一项所述的引物组。

8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，还包括孔板，针对不同靶标位点扩增的引物对分别设置在孔板的不同孔中；

优选的，针对相同靶标位点的不同变异设置不同的引物对，相同靶标位点的不同引物对设置在相邻的两个孔中；

更为优选的，所述孔板至少包括一组孔槽，每组孔槽包括6个孔，每组孔槽的每个孔分别包括靶标位点为c.1694G、c.1694GC、c.1972G、c.1972GA、c.2561C和c.2561CT的引物对；

和/或，所述每个孔中均无额外设置内参引物。

9.一种基于非治疗目的检测Diego血型的方法，其特征在于，包括：提取待测血液中的DNA作为模板，以权利要求1-6任一项所述的引物组作为扩增引物，进行实时荧光PCR扩增，获得荧光信号与温度变化的熔解曲线，根据熔解曲线判断分型结果。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述实时荧光PCR扩增的PCR扩增程序为：