[发明专利]一种青岛百合的种球繁育方法

权利要求书

1.一种青岛百合的种球生产方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)外植体消毒及预处理：弃去百合种球最外层鳞片，将中层和内层鳞片清洗干净、消毒，然后晾干；

(2)小芽球的诱导：将步骤(1)处理好的中层和内层百合鳞片接种入生产培养基，培养2个月后，长出直径0.3-0.5cm的小芽球；

(3)小芽球的转接：将直径0.3-0.5cm的小芽球切下，转入生产培养基，每2个月继代1次，继代2次后，挑选直径1.0-2.0cm的百合球，剥下鳞片横切成3-4段，放入2.0mg/L的BA溶液中浸泡10-20min，取出后在无菌滤纸上稍吹干，转接入生产培养基，培养2个月后，长出直径0.3-0.5cm的小芽球；

(4)芽球增殖：重复步骤(3)即可循环生产大量百合小芽球；

(5)成品种球的获得：将步骤(4)获得的小种球在生产培养基上每2个月继代1次，继代5次后可获得直径4-5cm的成品种球；

(6)种球的低温冷藏：将步骤(5)得到的成品种球放入冷库4℃冷藏60天，解除休眠；

(7)移栽驯化及商品种球的获得：将冷藏的种球摆放于水苔中，室温炼苗1个月，再栽至于种植基质中种植1年，即可获得商品种球；

所述种植基质为：按重量比将松树锯末70-80份，干鸡粪5-10份，腐殖酸5-10份和海藻粉1-5份，混合均匀后粉碎成1-2mm的颗粒，充分腐熟发酵，至基质变黑色疏松柔软后，加入2％的石灰氮并混合均匀，夏季高温闷晒1周后，打开晾晒5-7天即可使用

步骤(2)-(5)中，生产培养基均为MS培养基附加0.2-0.5mg/L IBA、20-50g/L蔗糖和6.5g/L琼脂粉，并调节pH值为5.8，培养条件均为24±1℃，黑暗培养。

2.根据权利要求1所述的青岛百合的种球生产方法，其特征在于，步骤(2)-(5)中，生产培养基均为MS培养基附加0.5mg/L IBA、50g/L蔗糖和6.5g/L琼脂粉，并调节pH值为5.8。

3.根据权利要求1所述的青岛百合的种球生产方法，其特征在于，步骤(1)外植体消毒及预处理具体步骤为：先将百合种球弃去最外层鳞片，将中层和内层鳞片用洗洁精清洗干净，流水冲洗半小时；将完整鳞片在超净台内75％的酒精消毒1min，无菌水冲洗3次；然后用有效氯2％的次氯酸钠溶液消毒10-15min，每100ml滴加1滴吐温，反复摇晃消毒后用无菌水冲洗7次，彻底清洗掉次氯酸钠溶液残留，将消毒后的鳞片用解剖刀切去鳞片基部接触消毒液的部分1-3mm，再放置于无菌滤纸上在超净台内吹干30min。

4.根据权利要求3所述的青岛百合的种球生产方法，其特征在于，步骤(2)小芽球的诱导：将步骤(1)处理好的中层和内层百合鳞片放入冰箱冷冻24h，然后接种入生产培养基，培养2个月后，长出直径0.3-0.5cm的小芽球。

5.根据权利要求1所述的青岛百合的种球生产方法，其特征在于，步骤(6)种球的低温冷藏具体为：将直径4-5cm的成品种球，随瓶直接移入冷库中，4℃低温冷藏60天。

6.根据权利要求1所述的青岛百合的种球生产方法，其特征在于，步骤(7)移栽驯化及商品种球的获得具体为：冷藏后取出种球洗净培养基，平铺于干热灭菌的水苔基质中，均匀喷洒1g/L的甲基硫菌灵溶液，然后覆盖1-2cm厚水苔，定期喷水，维持基质湿度40％-60％，持续炼苗1个月，使种球逐步适应外界环境，驯化完的种球，放入1g/L甲基硫菌灵溶液中浸泡30min后晾干，然后栽种于基质中。