[发明专利]天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶测定试剂盒

说明书

本发明涉及测定试剂盒，具体为天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶测定试剂盒，该天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶测定试剂盒，该测定试剂盒可以抑制s‑AST酶活性，不抑制m‑AST酶活性，使得测定结果不受细胞质型AST的干扰影响，有利于提高其m‑AST酶的测定结果更加准确，并且本试剂盒各试剂配置简单，由较少构成的组分有利于节省生产成本和降低试剂配置操作时间，该测定试剂盒能够作为诊断肝细胞损害和心肌梗死的敏感指标，能够提供临床判断肝细胞和心肌细胞损害程度及临床疗效评估、预后判断的参考指标。

技术领域

本发明涉及测定试剂盒，具体为天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶测定试剂盒。

背景技术

天门冬氨酸氨基转移酶(AST)主要分布于心肌，其次为肝脏、骨骼肌和肾脏等组织中，天门冬氨酸氨基转移酶(AST)以其在细胞内分布的部位不同分为两种同工酶，一种主要分布于胞浆中,称细胞质型AST(s-AST)，另一种紧密附着于线粒体上，称线粒体AST(m-AST)。在临床表现上，AST测定有助于判定心和肝细胞有无坏死及损伤程度，AST增高常见于急、慢性重症肝炎、肝硬变、心肌炎、心肌梗塞、肾炎、胆管炎、皮肌炎、胰腺炎等病症。

由于心肌含AST量最高，其次是肝脏，所以心和肝细胞损伤后血中酶活性能迅速升高，因为当这些器官损伤时,可使s-AST和m-AST大量释放入血,致其血清水平升高；但是m-AST在血清中的半衰周期短,其消除速度比s-AST快5倍以上，在正常人血清中AST主要是s-AST，m-AST含量很低甚至缺失。

当组织细胞轻度损伤时,主要是细胞浆内的s-AST透过细胞膜释放入血,而线粒体内的m-AST有两层线粒体膜的保护,不易释放入血；只有当肝细胞或心肌细胞损害严重，引起线粒体崩解时，附着在线粒体上的m-AST会大量释放入血,导致血清中m-AST急剧升高。

由于两种同工酶在细胞中的分布不同,其升高可提示不同的临床意义,可为临床提供有价值的线索，尤其是测定血清血清m-AST增高可反映细胞结构损害的严重性，测定m-AST有助于了解细胞超微结构损伤及线粒体损害的严重程度，是诊断肝细胞损害和心肌梗死的敏感指标，并可作为临床判断肝细胞和心肌细胞损害程度及临床疗效评估、预后判断的参考指标。鉴于此，我们提出天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶测定试剂盒。

发明内容

为了弥补以上不足，本发明提供了天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶测定试剂盒。

本发明的技术方案是：

天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶测定试剂盒，包括校准试剂，所述测定试剂盒由相互独立的试剂一、试剂二组成；

所述试剂一各组分包括三羟甲基氨基甲烷缓冲液、乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、还原型辅酶Ⅰ、天门冬氨酸氨基转移酶s抗体；

所述试剂二各组分包括线粒体天门冬氨酸氨基转移酶抗体和L-天门冬氨酸。

优选的，所述测定试剂盒采用免疫抑制法抑制s-AST酶活性，m-AST酶活性不被抑制，采用连续监测法测定m-AST，具体测定反应式为：

优选的，所述试剂一各组分量具体为：

优选的，所述试剂二各组分量具体为：

三羟甲基氨基甲烷缓冲液                     100mmol/L；

线粒体天门冬氨酸氨基转移酶抗体             5ml/L；

L-天门冬氨酸                               3mmol/L。

优选的，所述试剂一和试剂二的溶剂均采用水或纯化水。