[发明专利]一种调控CAR-T细胞的方法与应用

说明书

本发明公开了一种调控CAR‑T细胞的方法与应用。本发明通过酪氨酸激酶抑制剂调控CAR‑T细胞，从而缓解和治疗CAR‑T细胞在用于治疗后可能产生的免疫相关毒性。本发明的调控方法能够调控多种CAR‑T细胞免疫毒性相关细胞因子的的表达，对相关毒性进行早期干预，降低严重毒性的发病率和死亡率，从而提高CAR‑T细胞的安全性。本发明所使用的调控方法中的达沙替尼是已批准用于临床治疗的抗肿瘤药物，在多种癌症治疗中均可作为应用，可以实现老药新用，具有重大经济价值。

技术领域

本发明属于细胞免疫治疗领域，具体涉及一种调控CAR-T细胞的方法与应用。

背景技术

嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T-cell，CAR-T)是一种通过对T细胞进行基因改造从而实现对肿瘤细胞靶向杀伤的免疫治疗技术，在癌症治疗中显示出巨大前景，特别是在血液恶性肿瘤中取得显著疗效，完全缓解率可达70％-90％。CAR-T细胞在血液肿瘤治疗中的成功，鼓舞研究人员将其用于实体瘤治疗。越来越多针对实体瘤的CAR-T细胞疗法的相继开展且取得一定效果。目前，FDA已批准6个靶向CD19或BCMA的CAR-T细胞产品用于治疗B细胞淋巴瘤。CAR-T正在改变恶性肿瘤的治疗方式，引领肿瘤治疗进入细胞治疗时代。

由于CAR-T细胞作为活药物的性质，细胞预计将长期持续存在，疗效可能持续数十年，但是这也可能与严重免疫相关毒性有关从而成为CAR-T临床应用的挑战。CAR-T治疗常见的免疫相关毒性包括细胞因子释放综合征(cytokine release syndrome,CRS)和免疫效应细胞相关的神经毒性综合征(immune effector cell-associated neurotoxicitysyndrome，ICANS)，根据临床CAR-T使用发现，CRS和ICANS的发生率分别为57％-93％和在20％-70％。此外，CAR-T免疫相关毒性的发生主要与CAR-T细胞输注后的急性细胞因子产生有关。研究发现CRS的特点为急性全身炎症、循环细胞因子水平升高以及继发性器官功能障碍，涉及多种细胞因子间相互作用的复杂网络。CAR-T免疫相关毒性可通过IL-6受体拮抗剂或皮质类固醇等方法实现控制和治疗，但是严重者也可能会危及生命。此外，皮质类固醇的使用会对CAR-T细胞活性造成不可逆的永久伤害，从而影响长期治疗效果。因此，研究能精确控制CAR-T细胞免疫相关毒性的策略至关重要。

研究人员通过优化CAR的结构来实现更特异和更安全地靶向肿瘤细胞从而降低免疫相关毒性的发生，如引入自杀基因HSV-TK或iCasp9等，构建双抗原特异性CAR、抑制性嵌合抗原受体(inhibitory chimeric antigen receptors，iCAR)、SynNotch CAR、小分子开关调控的CAR)。但是，以上方法均需要复杂的基因工程改造并且不能直接控制细胞因子的产生。

因此，如何能通过药物直接调控CAR-T细胞中细胞因子的表达，同时不影响CAR-T细胞的持久性，使其更精确可控成为提高其临床应用安全性的关键。

发明内容

本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种调控CAR-T细胞的方法与应用，能够调控CAR-T细胞中多种细胞因子的的表达，从而缓解和治疗CAR-T细胞在用于治疗后可能产生的免疫相关毒性，包括细胞因子释放综合征(CRS)和免疫效应细胞相关神经毒性综合症(ICANS)，增加CAR-T细胞的安全性。

本发明的第一个方面，提供一种调控CAR-T细胞的方法，所述方法为使用酪氨酸激酶抑制剂处理CAR-T细胞20～28h。

在本发明的一些的实施方式中，所述酪氨酸激酶抑制剂包括达沙替尼和/或其衍生物。

在本发明的一些的实施方式中，所述衍生物包括达沙替尼药学上可接受的盐、酯、水合物、溶剂化物、多晶型物、异构体或前药。

在本发明的一些实施方式中，所述异构体包括构造异构体、立体异构体、旋光异构体、区域异构体、几何异构体。