[发明专利]含有神经组织特异性胞外基质的可变形状有序微通道仿生神经支架、制备方法及应用

说明书

本发明公开一种含有神经组织特异性胞外基质的可变形状有序微通道仿生神经支架、制备方法及应用；制备纤维丝，将多个纤维丝捆扎修剪成束，向纤维丝束上添加可分泌细胞外基质的细胞，培养后能够被细胞外基质包裹成组织块；溶解组织块中的纤维丝，脱细胞后形成微通道神经组织特异性胞外基质仿生神经支架，能够用于外周神经及脊髓修复材料。加入了可分泌细胞外基质的一种或多种细胞后，支架中含有一型胶原、层粘连蛋白、纤维连接蛋白、三型胶原和其他多种神经组织特异性胞外基质，与自然形成的神经结构成分上更接近，可极好的引导神经再生。

技术领域

本发明属于生物技术领域，尤其是涉及一种含有神经组织特异性胞外基质的可变形状有序微通道仿生神经支架、制备方法及应用。

背景技术

神经损伤问题一直备受关注，严重的脊髓或周围神经损伤可导致患者瘫痪或永久丧失劳动力，给个人、家庭和社会带来了不可估量的损失和伤害。脊髓组织再生能力非常有限，损伤后常形成胶质瘢痕及纤维瘢痕，神经轴突在组织内部缺乏有效的结构来引导其定向生长。周围神经尽管具备一定的自我修复能力，短节段的周围神经缺损尚可以用自体神经移植的方式修复，但截取供体神经也造成机体部分功能的丧失，并且供体神经直径经常难以与所修复的神经匹配，尽管自体神经移植被认为是治疗周围神经缺损的金标准，但这些弊端也限制了自体神经移植在临床中的广泛应用。然而对于长节段周围神经损伤往往难以采用自体神经移植的方法来修复。

因此选择一种可替代自体移植修复神经损伤的方法就显得尤为的重要，组织工程神经导管是解决这一问题的必要手段。神经脱细胞后其结构为微通道多孔状。此外神经脱细胞基质富含一型胶原、层粘连蛋白、纤维连接蛋白、三型胶原及其他多种胞外基质。因此组织工程神经支架的结构和成分仿生是其获得良好功能的前提。仿生神经胞外基质成分的有序微通道神经支架一直是神经组织工程领域的制备难题。现有技术中，神经导管的制备大多为单通道，及单一的孔道，目前制备神经导管的方法有制备神经导管的方法有静电纺丝(CN201010595866.3，CN200910050507.7，CN201710606240.X)，相分离(冻干)(CN201310185808.7)、梯度冷凝(CN201210188002.9)、3D打印(CN201610573491.8)等。

静电纺丝技术仅可制备单孔神经支架，难以做到多阵列微孔结构。相分离技术制备的神经导管存在力学性能较差，结构及成分难以仿生的问题，其制备的支架孔隙很难有序并且孔隙直径不可控。3D打印方法虽然可制备多孔的神经导管，但限于很多材料的特性以及3D打印的精度，很难在单位面积内制备多通道微孔结构。3D打印制备单孔的结构精度最高可达200μm左右，但孔壁厚度往往较大，因此不适宜制备多有序微孔结构。神经组织的特异的胞外基质是促进神经再生的关键成分，因此制备出一种结构和成分仿生的神经导管，对更好的实现促进神经损伤修复具有重要的意义。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供一种含有神经组织特异性胞外基质的可变形状有序微通道仿生神经支架、制备方法及应用。

本发明采用的技术方案是：含有神经组织特异性胞外基质的可变形状有序微通道仿生神经支架制备方法，包括；

制备纤维丝，捆扎修剪成束；

向纤维丝束上添加可分泌细胞外基质的细胞，将纤维丝置于培养环境中，培养后纤维丝束生长为组织块；

取出组织块，溶解纤维丝，脱细胞后形成可变形状有序微通道神经支架。