[发明专利]一种在甘蓝型油菜花器官中特异表达的启动子及其应用

说明书

本发明提供了一种在甘蓝型油菜花器官中特异表达的启动子及其应用，属于植物基因工程与分子生物学技术领域；本发明中所述启动子记为ProBnaA07g27400D，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；所述启动子只在油菜的花器官中具有较强的表达能力，其可以驱动下游基因在植物花器官中特异性表达；所述启动子能够用于油菜菌核病抗病性研究、种质资源改良研究和基因工程研究。

技术领域

本发明属于植物基因工程与分子生物学技术领域，具体涉及一种在甘蓝型油菜花器官中特异表达的启动子及其应用。

背景技术

植物基因表达主要是转录水平的调控，其受多种顺式作用元件和反式作用因子的协调控制。其中，植物基因的启动子在基因的表达调控中起关键作用。启动子是RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA序列，其含有RNA聚合酶特异性结合和转录起始所需的保守序列元件，控制基因表达的强弱或者时空差异。按表达方式不同可将启动子分为组成型启动子、诱导型启动子和组织特异性启动子。其中，组织特异性启动子只在特定的组织或器官中起作用的启动子，可在植物体内对外源基因进行精确调控，减少外源基因对植株正常生长发育的影响等。因此，对组织特异性启动子功能的研究在植物基因工程领域具有重要的科学意义。

油菜是世界上重要的油料作物之一，也是最早成功地进行基因转化的植物之一。自1986年Mathew等用农杆菌介导法首次把新霉素磷酸转移酶基因(NPT-II)转入芥菜型油菜中并获得转基因植株以来，转基因油菜研究与发展在世界范围内取得了举世瞩目的进展，油菜成为了基因工程模式植物。目前，国内外将相关外源基因导入油菜，培育出抗虫、抗除草剂、抗病、品质改良和功能性状优良等的油菜新品种、新品系。

花器官是油菜重要的器官，其与油菜产量和抗菌核病极其相关，想要通过转基因来提高油菜的产量、含油量和抗菌核病等性状以及表达高价值的外源蛋白，便需要筛选出油菜内源的花器官特异表达的启动子。目前尚未有文献报道油菜内源的花器官特异表达的启动子及其应用。

发明内容

针对现有技术中存在的一些不足，本发明提供了一种在甘蓝型油菜花器官中特异表达的启动子及其应用；本发明中所述启动子记为ProBnaA07g27400D，其核苷酸序列如SEQID No.1所示；所述启动子只在油菜的花器官中具有较强的表达能力，其可以驱动下游基因在植物花器官中特异性表达；所述启动子能够用于油菜菌核病抗病性研究、种质资源改良研究和基因工程研究。

本发明中提供了一种在花器官特异表达的启动子，所述启动子的核苷酸序列如SEQ IDNo.1所示。

进一步地，所述启动子的顺式作用元件包括TATA-box、CAAT-box、光响应元件G-box、厌氧诱导响应元件ARE、参与脂肪酸代谢的转录因子结合元件STRE和MYC转录因子结合位点CATGTG。

进一步地，所述花器官包括甘蓝型油菜的花器官。

本发明中还提供了检测上述启动子的引物，所述引物为：

正向引物ProBnaA07g27400D-F：5’-AAGAATTCACGCTTAGTGCTGTCTGGAAAC-3’(SEQID No.2)；

反向引物ProBnaA07g27400D-R：5’-TTAGATCTACACACGGAGCCATTTGGTAATAA-3’(SEQID No.3)。

本发明中还提供了一种重组载体，所述重组载体包含上述启动子。

进一步地，所述重组载体为植物GUS表达载体pCAMBIA1301中插入上述启动子。

本发明中还提供了重组菌，所述重组菌包含上述启动子或上述重组载体。

本发明中还提供了上述启动子、重组载体、重组菌在调控目的基因在植物花器官组织中特异性表达的应用。