[发明专利]一种肝癌的生物标志物在制备原发性肝细胞癌的治疗产品中的应用

说明书

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种肝癌的生物标志物在制备原发性肝细胞癌的治疗产品中的应用。本发明发现提高原发性肝细胞癌在肝癌细胞中的表达会其促癌作用，因此，通过抑制hsa_circ_0072309的表达可以起到抑癌作用，可以作为肝癌的治疗目的的生物标志物。

本发明为于2021年09月30日提出的、申请号为202111179039.0、专利名称为《用于检测肝癌的生物标志物及其应用》的中国专利的分案申请。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种肝癌的生物标志物在制备原发性肝细胞癌的治疗产品中的应用。

背景技术

原发性肝癌是临床上最常见的恶性肿瘤之一,按细胞分型可将其分为肝细胞型、胆管细胞型及混合型肝癌，按肿瘤的形态可分为弥漫型、巨块型和结节型肝癌。肝癌发病率和死亡率在过去二十年中在全世界范围内迅速上升。目前对于肝癌的治疗方法主要有传统的手术治疗、介入治疗、放疗和超声消融等，但是这些传统方法的治疗结果均难以令人满意。近年来，随着医学分子生物学的发展以及人们对肝癌的病理机制的深入探索，越来越多的新的治疗方案被提出并进行临床试验，取得了可喜的成果。在此过程中，对肝癌发病机制和相关基因功能的深入研究，以及对新的早期诊断标志物的探索显得尤为重要。

circ RNAs(Circular RNAs，环形RNA分子)是一类不具有5' 末端帽子和3' 末端poly(A)尾巴，并以共价键形成环形结构的非编码RNA分子。circRNA是由非经典剪接方式进行反向剪接而形成。circRNAs广泛存在于人体细胞中。近年来，circRNA在癌症中所起的作用和功能成为癌症研究领域的新焦点。circRNA的独特特征不断地被揭示和发现，circRNA可以作为肿瘤的生物标志物的应用也不断的被揭示。但是目前在肝癌中是否存在同样的circRNA类潜在标志物国内外报道较少。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术存在的缺点和不足，而提供用于检测肝癌的生物标志物。

本发明提供一种肝癌的生物标志物在制备原发性肝细胞癌的治疗产品中的应用，所述生物标志物为hsa_circ_0072309。

本发明的有益效果如下：本发明发现了十个circRNA在肝癌肿瘤组织中的表达与正常组织中的表达有显著差异，可以作为肝癌的诊断目的的生物标志物。另外，本发明发现提高hsa_circ_0072309在肝癌细胞中的表达会其促癌作用，因此，通过抑制hsa_circ_0072309的表达可以起到抑癌作用，可以作为肝癌的治疗目的的生物标志物。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，根据这些附图获得其他的附图仍属于本发明的范畴。

图1中为circRNA表达折叠变化的热图 ；

图2为3对匹配的肝癌组织和相邻正常组织中差异表达的circRNA火山图；

图3为前10种差异显著的circRNA；

图4为采用qRT-PCR法检测10例HCC患者配对HCC及癌旁组织中三种

circRNA的表达水平；

图5为hsa_circ_0072309的Sanger测序界面位置序列；

图6 为双酶切载体构建及circLIFR过表达质粒转染细胞后的表达情况；

图7为载体转染293T细胞后的RNA电泳结果;其中，1为293T-control，2为293T-pLC5，3为293T-circLIFR;

图8为RT-qPCR实验结果显示转染circLIFR的293T细胞明显高表达；