[发明专利]倍半萜内酯作抗烟草花叶病毒药物的应用及其制备方法

说明书

本发明公开了一种倍半萜内酯作抗烟草花叶病毒药物的应用及其制备方法，所述倍半萜内酯应用于制备抗烟草花叶病毒产品。本发明在对薇甘菊进行综合治理的基础上，探索及应用相关的活性物质，将其变废为宝，变害为利，也是防控的一条重要途径。本发明首次发现薇甘菊中倍半萜类化合物具有抗TMV活性，丰富抗TMV化合物结构的多样性，研究成果进一步丰富了薇甘菊的生物活性谱，发掘了薇甘菊在植物源抗病毒药物方面的潜能。

技术领域

本发明涉及农药技术领域，具体为一种倍半萜内酯作抗烟草花叶病毒药物的应用及其制备方法。

背景技术

植物病毒病是农业生产中常见的一种病害，被称为“植物癌症”。烟草花叶病毒(TMV)是最具代表性的植物病毒。该病毒寄主范围广泛，高发于茄科植物中，最容易危害烟草和番茄，并引起重大病害。TMV侵染植物后叶片呈花叶或坏死斑，造成植株畸形、矮化，甚至死亡，导致农作物大幅度减产,品质降低。植物源活性物质具有低毒、低成本、对环境友好等特点。

薇甘菊(MikaniamicranthaH.B.K)为菊科(Asteraceae)假泽兰属(Mikania)，作为一种外来入侵物种，其生长和传播蔓延速度极快，攀援能力强，通过缠绕、覆盖影响其他植物的光合作用，最终致使被其覆盖的植物死亡，对入侵地的农林业生产、生态环境和生物多样性造成严重的破坏，危害性极大。薇甘菊含有倍半萜、二萜、黄酮、酚酸、木脂素、甾体等丰富的化学成分，具有调节植物生长、抗菌、抗癌、抗炎、杀虫等作用。但是，迄今为止，未见有从薇甘菊中提取分离倍半萜类化合物抗烟草花叶病毒的报道。

发明内容

针对以上问题，本发明提供了一种倍半萜内酯作抗烟草花叶病毒药物的应用及其制备方法，本发明提供的倍半萜类化合物的抗烟草花叶病毒活性好，对烟草花叶病毒侵染寄主具有良好的保护作用，能抑制病毒在烤烟K326中增殖的作用。

根据本发明的目的，本发明提供一种倍半萜内酯作抗烟草花叶病毒药物的应用，所述倍半萜内酯应用于制备抗烟草花叶病毒产品。

进一步地，所述倍半萜内酯为从薇甘菊中提取分离的倍半萜内酯。

进一步地，所述倍半萜内酯的浓度为50μg/mL。

根据本发明的另一个目的，本发明提供一种倍半萜内酯的制备方法，包括如下步骤：

S1，薇甘菊地上部分干燥粉碎，甲醇回流提取三次，每次30L，每次3h，用旋转蒸发仪浓缩得到甲醇提取物；

S2，将所得甲醇提取物溶于水，依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取，通过减压浓缩得到乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物；

S3，乙酸乙酯萃取物经硅胶200～300目柱色谱分离，用石油醚-丙酮体系为洗脱剂进行梯度洗脱，经TLC检测，得到Fr1～Fr5共5个不同馏分；

S4，Fr4经MCI除色素后，经硅胶200-300目柱色谱分离，用三氯甲烷-丙酮200:1～1:1洗脱，分成7个亚部分，分别为Fr4-1～Fr4-7，其中Fr4-1经重结晶析出白色晶体，为化合物1，Fr4-4经液相色谱柱乙腈：水50:50分离纯化为白色针状结晶，为化合物2；正丁醇萃取物经大孔树脂，乙醇-水梯度洗脱，浓缩得到Fr₁～Fr₅共5个不同馏分，Fr3经正相硅胶200～300目柱层析后，Fr3-1用石油醚-乙酸乙酯15:1～1:1梯度洗脱，纯化得无色油状物，为化合物3。

进一步地，所述化合物的1的分子式为

所述化合物的2的分子式为

所述化合物的3的分子式为

本发明的有益效果是：