[发明专利]一种基于液相基底的自动化HPLC-SERS联用系统及其应用

说明书

本发明属于在线分析检测技术领域，具体涉及一种基于液相基底的自动化HPLC‑SERS联用系统及其应用。高效液相色谱仪样品流出管道经三通阀后通过硅胶管与微芯片连接，所述的微芯片为储存Fesubgt;3/subgt;Osubgt;4/subgt;@Au与待测物混合溶液的微流控管，用于表面增强拉曼光谱检测。微芯片的正下方连接自动升降台，升降台上连接磁铁，检测过程中通过自动升降台控制磁铁的升降，一方面可实现对待测物的磁富集和表面增强拉曼光谱检测，另一方面随磁性消退亦可消除检测过程中的“记忆效应”。

技术领域

本发明属于在线分析检测技术领域，具体涉及一种基于液相基底的自动化HPLC-SERS联用系统及其应用。

背景技术

为了分离不易气化的大分子物质，科克兰(Kirkland)等人开发了世界上第二台高效液相色谱仪，其出版的《液相色谱的现代实践》一书，标志着高效液相色谱法(HPLC)的正式建立。随着科技的发展，高效液相色谱经历着不断的改进与创新，以其高效的分离效能、高检测灵敏度及高选择性等特点，广泛应用于化学、生物医药及食品安全等领域。

高效液相色谱存在优异性能的同时，仍然存在着一些缺陷，例如：对极性相近的物质分离性较差，不同的物质可能存在相同的保留时间，且无法提供物质分子结构信息等。因此，科学家们不断地尝试将高效液相色谱与其它技术联用，试图建立一种新的分离-分析技术，最常见的是高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)联用，其可以将多组分物质进行分离的同时，获得各组分物质结构信息。

1977年，VanDuyne等人发现粗糙后的贵金属能极大的增强分子的拉曼信号，他们把这种效应称为表面增强拉曼散射(Surface-enhanced Raman scattering,SERS)，对应获得的光谱称为表面增强拉曼光谱(Surface-enhanced Raman spectroscopy,SERS)。表面增强拉曼光谱凭借高检测灵敏度、较高的抗水相干扰性以及对检测物质的非破坏性，其与HPLC的联用受到越来越多的关注。(Jeanmaire D L,Duyne R.Surface RamanSpectroelectrochemistry:Part I.Heterocyclic,Aromatic,and Aliphatic AminesAdsorbed on the Anodized Silver Electrode[J].Journal of ElectroanalyticalChemistry and Interfacial Electrochemistry,1977,84(1):1-20.)

1988年，Freeman首次提出了高效液相色谱与表面增强拉曼光谱技术的联用，经过高效液相色谱分离的物质通过三通阀与银溶胶混合，随后在液体输送下到达检测室进行拉曼检测。该联用技术同时实现了对物质的在线分离与检测，其线性响应范围100ppb～50ppm，动态范围超过三个数量级。然而，实验过程中发现随着检测的进行，纳米粒子会逐渐黏在检测室壁上，产生“记忆效应”而影响后续检测，因此，后续检测过程中需频繁清洗检测室，这也成为该联用系统不可或缺的步骤和弊病。(Freeman R D,Hammaker R M,Meloan CE,et al.A Detector for Liquid Chromatography and Flow Injection AnalysisUsing Surface-Enhanced Raman Spectroscopy[J].Applied Spectroscopy,1988,42(3):456-459.)