[发明专利]一种美人鱼发光杆菌冻干保护剂及其制备方法和使用方法在审
| 申请号： | 202211549228.7 | 申请日： | 2022-12-05 |
| 公开（公告）号： | CN115747071A | 公开（公告）日： | 2023-03-07 |
| 发明（设计）人： | 于永翔;张正;王印庚;刘定远;王春元;廖梅杰;荣小军;李彬 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 |
| 主分类号： | C12N1/04 | 分类号： | C12N1/04;C12N1/20;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京睿智保诚专利代理事务所(普通合伙) 11732 | 代理人： | 刘晓静 |
| 地址： | 266071 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 美人鱼 发光 杆菌 保护 及其 制备 方法 使用方法 | ||
1.一种美人鱼发光杆菌冻干保护剂，其特征在于，包括如下组分：脱脂乳、脱纤维羊血、海藻糖、乳糖和聚乙烯吡咯烷酮。
2.根据权利要求1所述的冻干保护剂，其特征在于，以水为溶剂，包括如下浓度的组分：脱脂乳40～80g/L，脱纤维羊血10～40mL/L、海藻糖30～75g/L，乳糖25～60g/L，聚乙烯吡咯烷酮10～30g/L。
3.一种权利要求1或2所述的冻干保护剂的制备方法，其特征在于，将海藻糖、乳糖和聚乙烯吡咯烷酮溶解后灭菌，得到溶液A；将脱脂乳溶解后灭菌，过滤，得到溶液B；将所述溶液A、溶液B与脱纤维羊血混合后，得到所述冻干保护剂。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述过滤采用微孔滤膜进行，所述微孔滤膜的孔径为0.2～0.3μm。
5.一种权利要求1或2所述的冻干保护剂或权利要求3或4任一项制备的冻干保护剂的使用方法，其特征在于，将细菌悬液与权利要求1或2所述的冻干保护剂或权利要求3或4任一项制备的冻干保护剂混合后，经冷冻、冻干、密封。
6.根据权利要求5所述的使用方法，其特征在于，所述细菌悬液的浓度为108～1010CFU/mL；所述细菌悬液与所述冻干保护剂的体积比为1：1～2。
7.根据权利要求6所述的使用方法，其特征在于，所述冷冻的温度为-80～-60℃，时间为4～8h。
8.根据权利要求7所述的使用方法，其特征在于，所述冻干的温度为-45℃～-25℃；真空度为0.1～0.4mbar，时间为20～24h。
9.根据权利要求8所述的使用方法，其特征在于，所述密封是通过充入干燥二氧化碳，当气压达到0.09MPa时进行密封。
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