[发明专利]一种纳米药物晶体及其制备方法和应用

说明书

本发明属于生物医学纳米材料领域，公开了一种纳米药物晶体及其制备方法和应用。纳米药物晶体成分包括Au/HA、Ag/HA、CPT/HANC，可应用于常规乳腺癌细胞和BCSCs的抑制。基于AuNPs、AgNPs抑制CSCs作用机制的多样性与互补性，本申请制备出Au‑Ag@CPT/HANC可集两种金属粒子特性于一体，并表现出独特的光学及生物特性，辅以化疗药物的抗癌特性，实现多靶点抑制CSCs残存的目的。

技术领域

本发明属于生物医学纳米材料领域，具体涉及一种用于抗乳腺癌干细胞(BCSCs)的双金属纳米粒子修饰的纳米药物晶体(Au-Ag@CPT/HANC)及其制备方法、应用。

背景技术

乳腺癌是女性中最常见的癌症之一。尽管治疗后的生存率很高，但乳腺癌患者仍有很高的肿瘤复发和转移的风险。其原因在于，化疗药物虽然能够杀伤肿瘤组织中绝大多数处于快速增殖期的常规肿瘤细胞，缩减肿瘤组织块的体积，却很难清除其中相对含量较低的一类称之为肿瘤干细胞(CSCs)的细胞亚群。CSCs位于细胞层次结构的顶端，在肿瘤中含量极低，却可能是肿瘤演进的关键细胞，它们具有与正常干细胞相似的特征，如自我更新、多向分化、高表达某些干性相关基因等，与肿瘤的进展、耐药性、复发和转移等密切相关，是癌症复发与转移的根本原因。而开发CSCs多组分联合治疗策略才能多靶点抑制多种机制引发的CSCs残存现象。

近年来，人们发现纳米颗粒可以成为CSCs耐药性治疗的重要选择。更有证据表明由纳米颗粒介导的光热疗法可以刺激热生理反应来杀死癌细胞，作为一种非侵入性的治疗方式导致肿瘤中DNA的损伤和蛋白质的变性等从而引起凋亡。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明提供一种纳米药物晶体及其制备方法和应用，该纳米药物晶体生物相容性高，同时具有一定的光热效应，可有效抑制肿瘤球的形成。

本发明的上述目的是通过以下技术方案实现的：一种纳米药物晶体的制备方法，包括以下步骤：

1.HA溶液分别与HAuCl₄、AgNO₃溶液混合，超纯水定容后各自调节溶液pH，然后避光加热搅拌，分别得到透明质酸(HA)包被的单金纳米粒子(Au/HA)和透明质酸包被的单银纳米粒子(Ag/HA)，之后分别离心收集Au/HA、Ag/HA并重悬保存。

2.在浓度为0.001～1mg/mL的HA溶液中加入400μL0.01～10mg/mL的CPT溶液，超声破碎后避光磁力搅拌，碳酸酯膜(孔径范围为10～4000nm)过滤得到CPT/HANC。

3.取步骤1所得的Au/HA和Ag/HA溶液以一定摩尔比例混合均匀后超纯水定容，加入步骤2得到的CPT/HANC，避光磁力搅拌得到双金属纳米粒子修饰的纳米药物晶体(Au-Ag@CPT/HANC)。

4.将步骤3所得纳米药物晶体Au-Ag@CPT/HANC置于808nm近红外激光，2～4W功率下照射0～2min。

进一步的，所述步骤1中HA溶液与HAuCl₄溶液混合摩尔比为1:1～1:4，pH调节至7.5～9.5，避光加热温度为65～75℃。

进一步的，所述步骤1中HA溶液与AgNO₃溶液混合摩尔比为1:10～1:3，pH调节至8.5～11.0，避光加热温度为65～75℃。

进一步的，所述步骤3中Au/HA：Ag/HA：CPT/HANC摩尔比为10:10:1～1:4:3。