[发明专利]一种采用液相色谱同时测定维生素A和维生素E的方法

说明书

本发明涉及了一种采用液相色谱同时测定维生素A和维生素E的方法，色谱条件至少包括：色谱柱：C8‑C30反相色谱柱，且烷基中嵌入极性基团；其中，嵌入的极性基团为酰胺基、磺胺基、脲基或氨基甲酸酯基；流动相：A相：水，B相：甲醇；采用等度法或梯度法；等度法下，柱温为25‑50℃，流动相为90‑92％的甲醇水溶液；梯度法下，柱温为40‑50℃，初始流动相为90％甲醇水溶液，终止流动相为91‑94％的甲醇水溶液。本发明可同时对维生素A的全反式视黄醇和13‑顺式视黄醇，维生素E的α‑生育酚、β‑生育酚、γ‑生育酚和δ‑生育酚测定，色谱分离可达到基线分离效果，提高了液相色谱同时测定维生素A和维生素E的精度。

技术领域

本发明涉及维生素测定领域，特别是涉及一种采用液相色谱同时测定维生素A和维生素E的方法。

背景技术

维生素A(VitaminA)为环己烯加共轭多烯结构，多以棕榈酸酯或醋酸酯形式强化到婴幼儿或成人配方营养品中，且绝大多数是以天然全反式(all-trans)异构体(全反式视黄醇)存在，但在加热或理化因素的作用下，会产生各种顺式异构体，其中13-顺式视黄醇是最普遍和主要的活性异构体(活性约为全反式的75％)，其他异构体效价各不相同，因此建立维生素A异构体的分离分析方法，对于科学评价维生素A的活性具有重要意义。两者的结构式如下：

全反式视黄醇：

13-顺式视黄醇：

生育酚(Tocopherol)俗称维生素E，为脂溶性维生素。维生素E对人体有重要的生理功能，具有抗氧化、提高机体免疫力和延缓衰老等作用。另外，维生素E通过调整人体机能，对人类肿瘤细胞的生长和增殖有抑制作用。维生素E具有促进生育功能和良好抗氧化性能，是一种优良抗氧化剂和营养剂，己广泛应用于医药、食品、化妆品及饲料工业。根据甲基的数目和位置的不同分为α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚和δ-生育酚四种不同形式。四种生育酚有各自独特的生理活性，其中α-生育酚的生理活性最强、γ-生育酚有强的抗氧化能力。四种生育酚的结构式如下：

α-生育酚：

β-生育酚：

γ-生育酚：

δ-生育酚：

高效液相色谱法是分析维生素A和E的常用方法，我国关于食品中维生素A与E的标准方法(GB5009.82-2016)中，采用C30柱反相液相色谱法进行测定。但是由于维生素A中全反式视黄醇和13-顺式视黄醇为异构体，该法无法将二者分开，所以实际测定结果仅为维生素A的总含量。此外，从化学结构上来看，β-生育酚和γ-生育酚也为位置同分异构体，色谱分离也具有一定挑战。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供了一种采用液相色谱同时测定维生素A和维生素E的方法，可同时对维生素A的全反式视黄醇和13-顺式视黄醇，维生素E的α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚和δ-生育酚测定，色谱分离可达到基线分离效果，提高了液相色谱同时测定维生素A和维生素E的精度。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种采用液相色谱同时测定维生素A和维生素E的方法，所述维生素A中含有全反式视黄醇和13-顺式视黄醇；所述维生素E含有α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚和δ-生育酚；

所述的方法中，色谱条件至少包括：

色谱柱：C8-C30反相色谱柱，且烷基中嵌入极性基团；其中，嵌入的极性基团为酰胺基、磺胺基、脲基或氨基甲酸酯基；

流动相：A相：水，B相：甲醇；并采用等度法或梯度法；

等度法下，柱温为25℃-50℃，流动相为90％-92％的甲醇水溶液；

梯度法下，柱温为40℃-50℃，初始流动相为90％甲醇水溶液，终止流动相为91％-94％的甲醇水溶液。