[发明专利]一株克氏假单胞菌及其在污废水净化领域的应用

说明书

本发明涉及一株克氏假单胞菌(Pseudomonas knackmussii)phe001，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中科院微生物所，保藏号为CGMCC No.25227，保藏日期为2022年7月4日。该菌株能够高效降解水体中的苯酚，在苯酚浓度为500mg/L时，30℃条件下，可在2d达到85％以上的降解率；且该菌株能够提高生化系统的苯酚耐受度，增强系统的抗冲击力。

技术领域

本发明涉及一株克氏假单胞菌、包含该克氏假单胞菌的微生物菌剂及其在污废水净化领域的应用，属于环境微生物技术领域。

背景技术

苯酚废水主要来源于焦化、煤气、炼油和以苯酚或酚醛为原料的化工、冶炼和制药等生产过程。此类废水来源广、组成复杂、毒性大，人或动物吸入高浓度蒸气可致头痛、头晕、乏力、视物模糊、肺水肿等，同时也会抑制中枢神经或损伤肝、肾功能。

苯酚已被国家水污染控制中心列为重点消除的污染物，酚类污染已经威胁着人类和动物的安全，目前对于此类废水的处理方法主要有物理法、化学法和生物法，其中物理、化学法存在能耗大、成本高且容易引起二次污染等不足，而生物强化法则利用微生物的新陈代谢作用将废水中的酚类物质代谢转化为无毒的有机物或无机物，利用微生物体内的酶来分解酚以合成自身的有机质，使污水得到净化，这种方法不仅危害少，而且成本低廉，因此在苯酚污染的治理中起到越来越重要的作用。

目前的苯酚降解菌株大多存在降解效率低或者苯酚耐受度低的问题，因此获取高降解效率、高耐受度的菌株是当前亟待解决的问题。

发明内容

本发明针对现有的苯酚降解菌株在处理含苯酚废水的过程中所存在的降解效率低、苯酚耐受度低的问题，提供一株克氏假单胞菌、包含其的微生物菌剂及其在污废水的净化领域的应用。

一株克氏假单胞菌(Pseudomonas knackmussii)phe001，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中科院微生物所，保藏号为CGMCC No.25227，保藏日期为2022年7月4日，其16S rDNA序列如SEQ ID No:1所示，在没有特别说明的情况下，本发明中所述的克氏假单胞菌均是指克氏假单胞菌phe001菌株。

本发明的克氏假单胞菌自活性污泥中筛选分离获得，属假单胞菌、革兰氏阴性菌，在营养琼脂平板上30℃培养24h，形成乳白色且表面光滑的圆形菌落。

本发明提供的克氏假单胞菌的有益效果是：

(1)该菌株能够高效降解水体中的苯酚，在苯酚浓度为500mg/L时，30℃条件下，可在2d达到85％以上的降解率；

(2)该菌株可以耐受高浓度的苯酚，在苯酚浓度达到1000mg/L时，30℃条件下，可在8d实现85％以上的降解率；

(3)该菌株能够提高生化系统的苯酚耐受度，增强系统的抗冲击力。

本发明的克氏假单胞菌能够降解苯酚污染物的作用机理如下：

微生物菌株对酚类的降解本质上是酶促反应的过程，具体可分为羟化酶途径和羧化途径，其中好氧过程为羟化酶途径，苯酚首先经苯酚羟化酶转化为邻苯二酚，这是整个苯酚代谢途径的限速反应，由此决定了苯酚降解的动力学属性，邻苯二酚经邻位或间位途径开环裂解为三羧酸产物，进入物质和能量代谢，以此来降解苯酚。

本发明的克氏假单胞菌的发酵方法包括如下步骤：

(1)一级种子培养：无菌条件下，将克氏假单胞菌接种于营养培养基中，置于25-35℃、180-300r/min条件下培养20-36小时，获得一级种子培养液；