[发明专利]一株猫冠状病毒及其应用

说明书

本发明公开了一株猫冠状病毒，分类命名为猫冠状病毒(Feline Coronavirus)FCoV/WH/2022‑1，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCCNO:V202297。该病毒属于猫传染性腹膜炎病毒Ⅰ型，可以引起动物产生典型的FIP症状和病理变化，进而可用于构建攻毒模型并将其用于抗FIPV相关药物或疫苗的研究。本发明解决了现有毒株无法构建Ⅰ型FIPV动物模型的难题，为相关药物及生物制品研发提供稳定可靠的保障。

技术领域

本发明属于生物领域，涉及一株猫冠状病毒(Feline Coronavirus,FCoV)及其应用。

背景技术

猫传染性腹膜炎(Feline Infectious Peritonitis，FIP)是一种猫的渐进性、致死性传染病，主要发于2岁以下的猫及多猫环境。除了感染家猫之外，貂、老虎、猎豹、狮子等野生猫科动物亦见FIP。患病猫的一般临床症状包括嗜睡、厌食、体重减轻、发热、黄疸、腹部膨大、呼吸急促、淋巴结肿大、黏膜苍白、葡萄膜炎、共济失调、癫痫发作等。在发病猫的血液、渗出液、脑脊液、房水、组织(肝、脾、肾、肠系膜淋巴)均可检测到病毒存在。FIP的病原体是猫冠状病毒(Feline Coronavirus,FCoV)。

猫冠状病毒是有囊膜的、单股正链RNA病毒，隶属于冠状病毒科、冠状病毒属、尼多目病毒科。病毒粒子表面有刺突状纤突，病毒基因组大小约为30Kb。根据致病性不同，猫冠状病毒又被分为猫肠道冠状病毒(Feline Enteric Coronavirus,FECV)和猫传染性腹膜炎病毒(Feline Infectious Peritonitis Virus,FIPV)两种生物型，FECV感染仅引起轻微的、自限性的肠炎，FECV组织嗜性改变使其突变为FIPV，进而引起致命的FIP。根据病毒S蛋白的差异，猫冠状病毒又可以分为Ⅰ型和Ⅱ型两种血清型。Ⅱ型FCoV能够使用常见猫细胞系进行分离培养，是开展FCoV研究的主要材料。受限于合适的细胞系和未知的病毒受体，流行率更高(90％)的Ⅰ型猫冠状病毒分离培养困难，因此缺乏自然的Ⅰ型FIPV动物模型。

对FIPV的分子流行病学调查并不鲜见，但由于分离培养困难而缺乏FIPV攻毒模型。在动物水平对抗猫冠状病毒药物进行评估，只能依赖于广泛收集临床病例，大大影响了动物实验准确度和精密度。Wang等人通过反向遗传系统，将II型FIPV S蛋白胞外域替换到I型FIPV上，拯救出一株重组FIPV，建立了FIP口服感染模型(Wang et al2021)。但该重组病毒本质上属于Ⅱ型FIPV，不能完全反映占绝大多数的(90％)Ⅰ型FIP病例。

经过资料的查询和信息的核对，目前尚无Ⅰ型FIPV动物模型，主要原因在于缺乏可用于攻毒并产生临床症状的毒株。因此亟需稳定、可靠、接近自然发病的Ⅰ型FIP动物模型，应用于FIPV相关疫苗、药物的研发，这对现有技术中存在的问题的解决具有重大的科学意义与应用价值。

发明内容

本发明的目的是提供一株猫传染性腹膜炎病毒Ⅰ型毒株，该毒株可以引起动物产生典型的FIP症状和病理变化，进而可用于构建攻毒模型并用于抗FIPV相关药物或疫苗的研究，旨在解决现有毒株无法构建Ⅰ型FIPV动物模型的问题。

为实现上述目的，申请人从武汉市洪山区某动物医院的FIP病猫中筛选到一株猫冠状病毒，通过对该病毒的结构基因进行测序比对，发现其与目前所报道的I型FCoV相似性最高，因此鉴定该病毒属于血清型Ⅰ型猫传染性腹膜炎病毒。该病毒已于2022年11月10日送交中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为：CCTCC NO:V202297，分类命名为猫冠状病毒(Feline Coronavirus)FCoV/WH/2022-1，保藏地址：中国武汉。