[发明专利]一种流感和新冠二联通用多克隆抗体的制备与应用

权利要求书

1.一种多克隆抗体，其特征在于：所述多克隆抗体为抗流感病毒和新型冠状病毒通用的多克隆抗体，所述多克隆抗体通过用抗原免疫蛋鸡，取蛋鸡的卵黄制备获得，

所述抗原包括新冠病毒刺突蛋白受体结合域(RBD)和流感病毒血凝素(HA)，

所述新冠病毒刺突蛋白的RBD结构域(受体结合位点)选自下述任一种：

P1)、氨基酸序列是SEQ ID No.17第1-223位的RBD-PT蛋白；

P2)、氨基酸序列是SEQ ID No.18第1-223位的RBD-Beta蛋白；

P3)、氨基酸序列是SEQ ID No.19第1-223位的RBD-Delta蛋白；

P4)、氨基酸序列是SEQ ID No.20第1-223位的RBD-Omicron蛋白；

所述流感病毒血凝素(HA)选自下述任一种蛋白质：

P5)、氨基酸序列是SEQ ID No.21第1-504位的H1蛋白；

P6)、氨基酸序列是SEQ ID No.22第1-496位的H3蛋白；

P7)、氨基酸序列是SEQ ID No.23第1-530位的BV蛋白；

P8)、氨基酸序列是SEQ ID No.24第1-532位的BY蛋白。

2.根据权利要求1所述的多克隆抗体，其特征在于：所述多克隆抗体的制备方法包括：

S1)动物免疫，包括用抗原免疫蛋鸡；

S2)抗体纯化。

3.根据权利要求2所述的多克隆抗体，其特征在于：S1)所述动物免疫包括：

S1-1)、使用H1蛋白、H3蛋白、BV蛋白和BY蛋白进行第一次免疫；

S1-2)、使用RBD-PT蛋白和RBD-Beta蛋白进行第二次免疫；

S1-3)、使用H1蛋白、H3蛋白、BV蛋白和BY蛋白进行第三次免疫；

S1-4)、使用RBD-Delta蛋白和RBD-Omicron蛋白进行第四次免疫；

S1-5)、使用H1蛋白、H3蛋白、BV蛋白和BY蛋白进行第五次免疫；

S1-6)、使用RBD-PT蛋白、RBD-Beta蛋白、RBD-Delta蛋白和RBD-Omicron蛋白进行第六次免疫。

4.根据权利要求3所述的多克隆抗体，其特征在于：所述S1-1)、S1-3)和S1-5)中H1蛋白、H3蛋白、BV蛋白和BY蛋白的质量比为1:1:1:1；

S1-2)中RBD-PT蛋白和RBD-Beta蛋白的质量比为1:1；

S1-4)中RBD-Delta蛋白和RBD-Omicron蛋白的质量比为1:1；

S1-6)中RBD-PT蛋白、RBD-Beta蛋白、RBD-Delta蛋白和RBD-Omicron蛋白的质量比为1:1:1:1。

5.根据权利要求3所述的多克隆抗体，其特征在于：

所述S1-1)、S1-3)和S1-5)中H1蛋白、H3蛋白、BV蛋白和BY蛋白的免疫量分别为5μg；

所述S1-2)中RBD-PT蛋白和RBD-Beta蛋白的免疫量分别为10μg；

所述S1-4)中RBD-Delta蛋白和RBD-Omicron蛋白的免疫量分别为10μg；

所述S1-6)中RBD-PT蛋白、RBD-Beta蛋白、RBD-Delta蛋白和RBD-Omicron蛋白的免疫量分别为5μg。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的多克隆抗体，其特征在于：S2)抗体纯化包括如下步骤：

S2-1)、采集卵黄，稀释后离心收集上清液；

S2-2)、向S2-1)收集的上清液加入辛酸，离心后收集上清液；

S2-3)、将S2-2)收集的上清液通过超滤膜超滤浓缩，获得含有抗体的浓缩液；

S2-4)、将S2-3)收获的浓缩液用分子筛层析，根据峰值收集目的蛋白溶液；

S2-5)、将收集到的蛋白溶液浓缩即为获得的卵黄抗体。