[发明专利]一种抗根腐病的微生物菌剂及其制备方法

权利要求书

1.一种抗根腐病的微生物菌剂，其特征在于，包括以下重量份的原料制备而成：有机组分90-120份、磷酸二氢钾10-20份、尿素18-30份、载体50-80份、微生物菌粉20-30份、有机粘接剂3-5份。

2.根据权利要求1所述抗根腐病的微生物菌剂，其特征在于，所述有机组分为腐植酸和/或糠醛渣。

3.根据权利要求1所述抗根腐病的微生物菌剂，其特征在于，所述载体为改性的硅藻土，具体制备方法为：

(1)煅烧除杂：将硅藻土置于马弗炉，以5℃/min的升温速率升温到350℃，并在350℃下煅烧1.5h，煅烧结束后自然冷却至室温，密封保存；

(2)混合改性：将2-4g六水合三氯化铁溶于100mL去离子水中，再加入20-40mL纳米硅溶胶，再加入5-10g步骤(1)煅烧后的硅藻土，超声处理20-30min后，通入氮气并机械搅拌1h后，搅拌状态下逐滴加入NaBH₄溶液，滴加完毕后，继续搅拌60min使其充分反应，整个过程在通氮气条件下进行；真空抽滤，用去离子水和乙醇洗涤固体颗粒，后真空干燥，得到改性硅藻土。

4.根据权利要求1所述抗根腐病的微生物菌剂，其特征在于，步骤(2)NaBH₄溶液的浓度为1.0mol/L，加入量为150-200mL。

5.根据权利要求1所述抗根腐病的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌粉为副地衣芽孢杆菌、副黄假单胞菌和多粘类芽孢杆菌按照质量比1:1:1混合而得，其中副地衣芽孢杆菌保藏编号为CGMCC1.15832，副黄假单胞菌保藏编号为CGMCC1.15634，多粘类芽孢杆菌保藏编号为CGMCC1.15984。

6.根据权利要求5所述抗根腐病的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌粉的制备方法为：

(1)种子液制备：将三种菌株分别解冻活化，平板划线后于28℃培养箱培养48h，取一环培养好的菌株于NB液体培养基中，置于30℃、180r/min摇床中振荡培养24h，得到种子液；

(2)将三种菌株的种子液以3％的接种量分别接种到液体培养基中，装瓶量200mL/500mL，33℃，210r/min振荡培养72h，即得发酵液；

(3)将发酵液过滤后进行喷雾干燥，得到菌粉，再将三种菌粉等质量混合后得到所述微生物菌粉。

7.根据权利要求1所述抗根腐病的微生物菌剂，其特征在于，所述有机粘接剂为环氧树脂。

8.一种权利要求1-7任意一项所述抗根腐病的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下制备步骤：

(1)制备载体：将硅藻土置于马弗炉，以5℃/min的升温速率升温到350℃，并在350℃下煅烧1.5h，煅烧结束后自然冷却至室温，密封保存；将2-4g六水合三氯化铁溶于100mL去离子水中，再加入20-40mL纳米硅溶胶，再加入5-10g煅烧后的硅藻土，超声处理20-30min后，通入氮气并机械搅拌1h后，搅拌状态下逐滴加入NaBH₄溶液，滴加完毕后，继续搅拌60min使其充分反应，整个过程在通氮气条件下进行；真空抽滤，用去离子水和乙醇洗涤固体颗粒，后真空干燥，得到改性硅藻土；

(2)制备微生物菌粉：将三种菌株分别解冻活化，平板划线后于28℃培养箱培养48h，取一环培养好的菌株于NB液体培养基中，置于30℃、180r/min摇床中振荡培养24h，得到种子液；将三种菌株的种子液以3％的接种量分别接种到LB液体培养基中，装瓶量200mL/500mL，33℃，210r/min振荡培养72h，即得发酵液；将发酵液过滤后进行喷雾干燥，得到菌粉，再将三种菌粉等质量混合后得到所述微生物菌粉；

(3)按重量份依次将载体、微生物菌粉、有机组分、磷酸二氢钾、尿素置于造粒机中混合均匀，加入有机粘接剂进行造粒，造粒完成后包装入库。