[发明专利]用于防治烟草霉烂病的复合菌剂、发酵方法及其施用方法

说明书

本申请公开了一种用于防治烟草霉烂病的复合菌剂、发酵方法及其施用方法，至少包括：生防菌BA08、生防菌BA20、生防菌BSRS‑1；生防菌BA08为枯草芽孢杆菌的一个株系，保藏编号为CCTCC No：M 2020549；生防菌BA20为枯草芽孢杆菌的一个株系，保藏编号为CCTCC No：M 2020548；生防菌BSRS‑1为桑肠杆菌的一个株系，保藏编号为CCTCC No：M2020550。该复合菌剂稳定性好，不仅是烘烤期烟草霉烂病的高效生防菌，而且对雪茄烟发酵过程中的霉变病也有较好防效。说明本申请提供的复合菌剂能对烟草霉烂病发挥较好的防治效果。

技术领域

本申请涉及微生物应用技术领域，特别是一种用于防治烟草霉烂病的复合菌剂、发酵方法及其施用方法。

背景技术

近年来，烘烤期烟草霉烂已成为我国南方部分烟区烘烤环节烟叶损失的重要原因之一。烟叶烘烤变黄期内，由于温湿度适宜，烟叶含水量高，死体营养型微生物容易滋生，是烟叶发生霉烂的主要时期。

引起烟叶腐烂的微生物种类较多，主要有青霉属、曲霉属、根霉属、毛霉属真菌，以及芽孢杆菌、乳杆菌和果胶杆菌属细菌等。近期课题组研究发现云南省大理州烟草霉烂病为由少根根霉(Rhizopus arrhizus)引起的真菌性病害(卢灿华,苏家恩,盖晓彤,等.烤烟霉变病原菌鉴定及其生防菌筛选[J].中国烟草科学,2022,43(2):45-51.)，可以为害烟叶叶柄、叶肉组织，以叶基霉烂型为主，发病率达30％以上，损失在20％左右。因此，烟草霉烂病对烟叶生产的危害十分严重。此外，雪茄烟在晾制和发酵过程中也普遍存在霉烂现象，亟需进行科技攻关，突破采后烟叶调制和发酵期烟叶的关键技术瓶颈。

烟草霉烂病的防治方法有化学药剂、设备改进和生物防治等方法。其中，生物防治由于其防效高、专一性强、环境友好，以及不易产生抗药性病毒株等优点，受到广泛的青睐。

目前，用于防治霉烂病的微生物报道较少，其中以单菌株的报道为主，例如贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)Z002(CN112322536A)、05-1205(CN112375700A)和GY1(CN112391315A)，胶质芽孢杆菌(B.mucilaginosus)YN2011(CN110384247A)；而复合生防菌则仅有组合微生物菌剂(CN110250209A)的报道。CN110250209A中公开了一种具有防治烟草霉烂病功能的微生物菌剂，微生物菌剂包括以下重量份的组分：枯草芽孢杆菌25～30份，解淀粉芽孢杆菌40～50份，胶质芽孢杆菌20～35份，吐温-20为0.05～0.15份、氮酮0.005～0.015份。该复合微生物菌剂经验证具有防治烟草霉烂病的功能，通过生长优势在烟叶叶柄形成竞争占位，同时其代谢产物能够抑制有害真菌，从而抑制病原菌的生长。

虽然CN110250209A中公开的复合菌剂虽然在烟草烘烤霉烂病中的防效可以达到95～100％，但该复合菌剂对于由少根根霉引发的烘烤霉烂病以及雪茄烟霉变病的防治效果并不明确，而且该复合菌剂所用复合菌种类属于现有已知功能菌株组合，未对其他未知菌株进行进一步的探索。

现有复合菌剂种类单一，功效单一，目前市场需求缺口较大，亟需开发多种复合生防菌剂，满足烟叶烘烤、调制期霉烂病的绿色防控，实现烟草产业高质量发展和绿色转型。

发明内容

本申请提供了一种用于防治烟草霉烂病的复合菌剂、发酵方法及其施用方法，用于解决现有技术中存在的缺乏针对烟草霉烂病的有效复合菌剂的技术问题。

本申请提供了一种用于防治烟草霉烂病的复合菌剂，至少包括：生防菌BA08、生防菌BA20、生防菌BSRS-1；

生防菌BA08为枯草芽孢杆菌(Bacillus.subtilis)的一个株系，保藏编号为CCTCCNo：M 2022549；

生防菌BA20为枯草芽孢杆菌(Bacillus.subtilis)的一个株系，保藏编号为CCTCCNo：M 2022548；