[发明专利]一种养殖海水小球藻的方法有效
| 申请号： | 202211416791.7 | 申请日： | 2022-11-14 |
| 公开（公告）号： | CN115449485B | 公开（公告）日： | 2023-03-31 |
| 发明（设计）人： | 关月;邱琦;马立新;刘建;郭井瑶;崔会冲;李玲;徐静怡;李福林 | 申请（专利权）人： | 天津长芦汉沽盐场有限责任公司;天津汉盐科瑞生物科技有限责任公司 |
| 主分类号： | C12N1/12 | 分类号： | C12N1/12;C12R1/89 |
| 代理公司： | 天津展誉专利代理有限公司 12221 | 代理人： | 齐文娟 |
| 地址： | 300450 天*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 养殖 海水 小球藻 方法 | ||
1.一种养殖海水小球藻的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1：对小球藻藻种进行保种、育种作业；
具体包括：将小球藻藻种置于固体培养基中进行保种、置于锥形瓶中进行育种；保种温度为5-8℃，光照强度为1000-1500lx，光暗比为12h：12h；育种温度为22-26℃，光照强度为2000-5000lx，光暗比为12h：12h；
固体培养基的保种过程具体为：盐度为3%的卤水，加入20%琼脂粉，溶解后灭菌，配制平板固体培养基，冷却凝固后使用三区划线法对小球藻细胞进行保种；
锥形瓶中设有第一液体培养基，第一液体培养基配方为：盐度为3-5%的卤水，尿素0.2-0.3 g/L，KH2PO40.03-0.05 g/L，FeCl33-4mg/L，Na2EDTA4-5 mg/L，NaHCO31-1.5g/L，VB1和VB12溶液，VB1和VB12溶液的加入量与藻液的比均为3000:1；
S2：将S1中完成育种的小球藻藻种接种至一级扩种工序球形瓶形成藻液，进行培养；
具体包括：一级扩种工序球形瓶内的培养温度为20-24℃，光照强度为4000-6000lx，光暗比为14h：10h，通入二氧化碳和空气的混合气体，通气时间比为14h：10h，二氧化碳的气体浓度为1000ppm；
一级扩种工序球形瓶中设有第二液体培养基，第二液体培养基配方为：盐度为3-5%的卤水，尿素0.2-0.3 g/L，KH2PO40.03-0.05 g/L，FeCl33-4mg/L，Na2EDTA4-5 mg/L，VB1和VB12溶液，VB1和VB12溶液的加入量与藻液的比均为3000:1；
S3：将S2中完成培养的藻液接种至管道式光生物反应器中培养；
具体包括：管道式光生物反应器内的培养温度为20-30℃，通入二氧化碳和空气的混合气体，通气时间比为14h：10h，二氧化碳的气体浓度为1000 ppm；
S4：将S3中完成培养的藻液接种至跑道池中培养；
管道式光生物反应器和跑道池中均设有第三液体培养基，第三液体培养基配方为：盐度为3%的卤水，尿素0.2-0.3g/L，KH2PO40.03-0.05g/L，FeCl33-4 mg/L，Na2EDTA4-5mg/L；
S2中小球藻藻种与液体培养基的接种比例为1：3，S3中藻液与液体培养基的接种比例为1：10，S4中藻液与液体培养基的接种比例为1：20。
2.根据权利要求1所述的一种养殖海水小球藻的方法，其特征在于，在121℃条件下，分别对第一液体培养基中的卤水和第二液体培养基中的卤水灭菌设定杀菌时间，再分别冷却至室温。
3.根据权利要求2所述的一种养殖海水小球藻的方法，其特征在于，所述杀菌时间为20min。
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