[发明专利]一种利用微基质胶球快速培养类器官的方法有效
| 申请号： | 202211384503.4 | 申请日： | 2022-11-07 |
| 公开（公告）号： | CN115558633B | 公开（公告）日： | 2023-08-15 |
| 发明（设计）人： | 万旭东;李胜;杨云旭 | 申请（专利权）人： | 成都诺医德医学检验实验室有限公司;广州精科生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 重庆恩洲知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 50263 | 代理人： | 易真珍 |
| 地址： | 610043 四川省成都市武侯区星狮路*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 基质 快速 培养 器官 方法 | ||
1.一种利用微基质胶球快速培养类器官的方法，其特征在于，所述方法利用微基质胶球悬浮于液-油培养体系实施，具体包括以下步骤：
步骤一：在细胞培养基顶部加入矿物油，使所述矿物油覆盖所述细胞培养基制得液-油培养体系，所述液-油培养体系的细胞培养基与矿物油的体积比为1:1；
步骤二：获取细胞，使所述细胞与基质胶混合均匀，制得细胞终浓度为1×105～5×105个/ml的细胞悬液；
步骤三：使用微小注射工具将步骤二所得的细胞悬液注射到步骤一制得的液-油培养体系的矿物油层中，使与基质胶混合的细胞从所述微小注射工具排出形成微小基质胶液滴，所述微小基质胶液滴的体积为0.3-0.5μl，所述微小基质胶液滴在矿物油中再形成微小基质胶球并穿过矿物油层到达细胞培养基层并悬浮于其中；
步骤四：待微小基质胶球全部进入所述液-油培养体系的细胞培养基层并悬浮于其中，放入培养箱培养，所述液-油培养体系的细胞培养基与所述微基质胶球的比例为5:1；每隔8-12小时晃动一次培养物，促进氧气和营养物质的吸收和代谢废物的排出。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述微小注射工具包括微小注射器、微细导管和微流控操作仪器中的一种或几种。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤二中所述细胞与所述基质胶的比例为100～500个细胞/μl。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述细胞来自人体正常组织或肿瘤细胞，并且消化为单细胞。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述培养箱培养的条件为30℃-37℃，5％CO2。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤二中细胞与基质胶混合均匀的方法包括充分吹打或振摇。
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