[发明专利]一种糖尿病模型的建立方法

说明书

本发明提供一种糖尿病模型的建立方法，涉及生物技术领域，所述方法包括如下步骤：(1)配制葡萄糖溶液、(2)桑叶预处理、(3)家蚕的选择、(4)家蚕的饲养和(5)血糖、体重的测定。通过本发明的方法可以在较短时间内(5‑7天)诱导出糖尿病的典型特征，其构建方法简单，仅给予含糖桑叶配合在低温环境下饲养即可实现，易于操作，值得推广。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其是涉及了一种糖尿病模型的建立方法。

背景技术

糖尿病(diabetes mellitus，DM)是一组与遗传和环境因素密切相关，以慢性高血糖以及胰岛素抵抗为特征，伴有胰岛素分泌缺乏的代谢性疾病。发病机制十分复杂且可引起一系列严重并发症，例如视网膜病变，肾脏疾病和周围神经病变。根据国际糖尿病联盟(Iternational Diabetes Federation，IDF)最新数据显示，2021年全球约5.37亿成年人(20-79岁)患有糖尿病(10个人中就有1人为糖尿病患者)；预计到2030年，该数字将上升到6.43亿；到2045年将上升到7.83亿。在此期间，世界人口估计增长20％，而糖尿病患者人数估计增加46％。由于糖尿病在世界范围内的高发病率，我们迫切需要进行广泛的研究以确定其发病机制并开发新的抗糖尿病药物。血浆葡萄糖水平受全身组织摄取和代谢的调节。因此，评估抗糖尿病药物需要使用适当的动物模型，使其可以定量测定血浆葡萄糖水平。

适当的实验动物模型是理解发病机制、并发症、增加二型糖尿病风险的遗传或环境影响以及测试各种治疗药物的必要工具。然而，近十几年来,诸如小鼠和大鼠之类的一系列糖尿病哺乳动物被用来筛选抗糖尿病药物，但是这些模型具有严重的局限性，如动物福利的伦理问题、造模周期长、成模率低并且维持大量动物需要超高成本等问题。

由此可见，建立一种理想的糖尿病实验动物模型以减少资源浪费、降低造模成本、缩短研究周期和解决动物伦理问题迫在眉睫。

发明内容

本发明的目的在于针对以上要解决的技术问题，提供一种新型糖尿病动物模型的建立方法。

具体的，本发明采用了如下的技术方案：

一种糖尿病模型的建立方法，该方法包括如下步骤：

(1)配制葡萄糖溶液：用超纯水溶解无水葡萄糖，配制得到浓度为0.25mg/ml的葡萄糖溶液；

(2)桑叶预处理：将步骤(1)配制得到的葡萄糖溶液均匀喷洒在桑叶表面，晾干表面水分后备用；

(3)家蚕的选择：选择在25-30℃的环境下饲养、体重为0.9-1.0g，且已完成第四次蜕皮的五龄幼虫家蚕；

(4)家蚕的饲养：将所述五龄幼虫家蚕置于低温条件下饲养，饲养期间喂食经步骤(2)处理后的桑叶；饲养的具体条件为：温度为16-20℃、湿度为60-70％；

(5)血糖、体重的测定：饲养期间，每日测定家蚕的血糖及体重，当血糖7.0mmol/L，且胰岛素作用迟缓或抵抗时，确定糖尿病动物模型成功建立。

具体为二型糖尿病模型的建立。

本发明中，进一步的，所述步骤(1)中葡萄糖溶解为在水浴加热下进行溶解，水浴温度为50-60℃，水浴时间为20-30min。

本发明中，进一步的，所述步骤(2)中葡萄糖溶液喷洒桑叶为在桑叶的背面进行喷洒，喷洒后晾至无滴水，接着将处理后的桑叶采用保鲜膜包裹并于4℃的条件下冷藏保存，待用。

本发明中，进一步的，所述步骤(3)的家蚕选用的品种为两广二号，所述家蚕在第四次蜕皮禁食过夜。

本发明中，进一步的，所述步骤(4)中的低温条件为：温度为18℃，湿度为65％。

本发明中，进一步的，所述步骤(5)血糖测定的时间为餐后8h，体重测定时间为早上第一次给食后8h。