[发明专利]一种区分半夏不同炮制品的方法

权利要求书

1.一种区分竹沥半夏和清半夏、法半夏、姜半夏的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）制备供试品溶液：分别将竹沥半夏饮片、标准汤剂或其配方颗粒研细，称量，加入10%~30%甲醇水溶液，称定重量，提取，再称定重量，用相应的溶剂补足减失的重量，摇匀，2~10℃静置8h以上，离心，过滤，取续滤液，即得供试溶液；

（2）制备对照品溶液：分别称定对照品酪氨酸、色氨酸和6-姜辣素，加入10%甲醇溶液作为对照品参照物溶液；

（3）超高效液相色谱检测：分别取供试溶液或对照品溶液，注入超高效液相色谱仪，按220nm~270nm波长、以乙腈为流动相A，0.15%磷酸为流动相B的条件下进行超高效液相色谱检测，记录色谱图；所述超高效液相色谱检测中的色谱柱为CORTECS UPLC T3或ZORBAXEclipse Plus C18；所述超高效液相色谱检测中的色谱柱柱温为20~30℃，流速为0.25~0.32ml/min；梯度洗脱为：0~5min，流动相A的体积分数为0%，流动相B的体积分数为100%；5~18min，流动相A的体积分数变化为0→8%，流动相B的体积分数变化为100→92%；18~23min，流动相A的体积分数变化为8→14%，流动相B的体积分数变化为92→86%；23~28min，流动相A的体积分数为14%，流动相B的体积分数为86%；28~45min，流动相A的体积分数变化为14→60%，流动相B的体积分数变化为86→40%；45~47min，流动相A的体积分数为60%，流动相B的体积分数为40%；47~50min，流动相A的体积分数为60→0%，流动相B的体积分数为40→100%；50~58min，流动相A的体积分数为0%，流动相B的体积分数为100%；

（4）分析：在色谱图中选取相对保留时间稳定的峰作为特征峰，再与对照品溶液图谱的峰进行比较，确定竹沥半夏的8个特征峰；取酪氨酸为对照品时，峰1为酪氨酸的色谱峰；取色氨酸为对照品，峰5为色氨酸的色谱峰；取6-姜辣素为对照品，峰8为酪氨酸的色谱峰，与酪氨酸参照物相应的峰为S1峰，计算峰2与S1峰的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±10%范围以内，峰2规定值为1.77，与色氨酸参照物相应的峰为S2峰，计算峰3、峰4、峰6、峰7与S2峰的相对保留时间，其相对保留时间均应在规定值的±10%范围之内，峰3、峰4、峰6、峰7规定值分别为：0.83、0.90、1.21、1.56；

（5）区分：分别将供试品溶液色谱图与对照品溶液色谱图进行比较；当供试品溶液色谱图仅有峰1、峰5时，该供试品为法半夏饮片、标准汤剂或其颗粒；当供试溶液色谱图有峰1、峰2、峰3、峰5、峰6时，该供试品为清半夏饮片、标准汤剂或其颗粒；当供试溶液色谱图有峰1、峰2、峰3、峰5、峰6、峰8时，该供试品为姜半夏饮片、标准汤剂或其颗粒；当供试溶液色谱图含有8个峰时，该供试品为竹沥半夏饮片、标准汤剂或其配方颗粒。

2.根据权利要求1所述区分竹沥半夏和清半夏、法半夏、姜半夏的方法，其特征在于，步骤（1）中提取方式为振荡、超声或回流。

3.根据权利要求1所述区分竹沥半夏和清半夏、法半夏、姜半夏的方法，其特征在于，步骤（1）中提取时间为15~60min。

4.根据权利要求1所述区分竹沥半夏和清半夏、法半夏、姜半夏的方法，其特征在于，步骤（1）中提取量为5~25ml。

5.根据权利要求1所述区分竹沥半夏和清半夏、法半夏、姜半夏的方法，其特征在于，步骤（3）中所述供试品溶液或对照品溶液的进样量为2µl。

6.根据权利要求1所述区分竹沥半夏和清半夏、法半夏、姜半夏的方法，其特征在于，步骤（4）中的相对保留时间是若干组实验结果的平均值。