[发明专利]非洲猪瘟病毒pA104R蛋白免疫优势性B细胞抗原表位及其单克隆抗体与应用

说明书

本发明公开了一种非洲猪瘟病毒pA104R蛋白免疫优势性B细胞抗原表位及其单克隆抗体与应用，属于分子免疫学技术领域。本发明的非洲猪瘟病毒pA104R蛋白的单克隆抗体由保藏编号为CCTCC NO：C2022334的杂交瘤细胞株产生，该单克隆抗体识别表位位于pA104R蛋白的MSTKKKPTITKQELYSL区，其为pA104R蛋白免疫优势性B细胞抗原表位区。本发明可广泛应用于非洲猪瘟病毒的病原学诊断、血清学诊断、免疫学检测、疾病防治，应用于非洲猪瘟疫苗的制备，及致病机理研究等。本发明为制备非洲猪瘟疫苗和诊断试剂提供了新的材料，为制备抗非洲猪瘟病毒药物提供了新的方向。

技术领域

本发明属于分子免疫学技术领域，具体涉及一种非洲猪瘟病毒pA104R蛋白优势性B细胞抗原表位多肽及其单克隆抗体与应用。

背景技术

非洲猪瘟(ASF)是一种具有高度传染性的出血性疾病，以高热、毒血症、出血性素质和高死亡率为特点。非洲猪瘟病毒(ASFV)是非洲猪瘟病毒科非洲猪瘟病毒属的唯一成员，也是唯一的大型虫媒DNA病毒。这种疾病由于发病率和死亡率高，常常给受影响国家的养猪业造成毁灭性的经济损失，因此被世界动物卫生组织(OIE)列为法定报告疾病，我国也将其列为重点防范的一类动物疫病。

尽管疫苗接种是控制大多数动物疾病的理想方法。但由于病毒基因组和病毒组成的复杂性，免疫与感染机理不清阻碍了疫苗的研发。迄今为止，还没有可用于预防和控制ASFV感染的商品疫苗和有效的抗病毒药物。为了促进该病防控技术研究，迫切需要开展ASFV重要抗原蛋白免疫学功能研究，解析鉴定具有免疫保护功能及血清学诊断价值的病毒蛋白抗原。

发明内容

pA104R是非洲猪瘟病毒编码的一种具有组蛋白样特征的结构蛋白，参与病毒的DNA复制、转录、及基因组包装，是一种ASFV复制所必须的蛋白。pA104R免疫原性强能够在病毒感染的动物体诱导较高的抗体水平，被认为是一种极具价值的疫苗候选基因。已有研究表明pA104R能够抑制天然免疫，其发挥生物学功能的DNA结合功能区位于蛋白中后端区域(中国专利CN114989266A，一种非洲猪瘟病毒pA104R蛋白免疫抑制相关氨基酸位点及其应用)。

本发明的目的在于提供一种非洲猪瘟病毒pA104R蛋白的单克隆抗体与其应用，以及提供一株分泌所述单克隆抗体的杂交瘤细胞。

本发明的目的还在于提供非洲猪瘟病毒pA104R蛋白的优势性B细胞抗原表位肽与其应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种非洲猪瘟病毒pA104R蛋白的单克隆抗体AH7，由杂交瘤细胞株AH7产生。所述的单克隆抗体AH7的识别表位位于pA104R蛋白的MSTKKKPTITKQELYSL(SEQ ID NO.1) 区，该区域氨基酸序列在所有基因型非洲猪瘟病毒中高度保守，且不包含该蛋白免疫抑制区。

所述的杂交瘤细胞株AH7，于2022年10月25日保藏于中国典型培养物保藏中心(地址：中国武汉武汉大学)，其分类命名为杂交瘤细胞株AH7，保藏编号为CCTCC NO：C2022334。

所述的非洲猪瘟病毒pA104R蛋白免疫优势性B细胞抗原表位，其位于pA104R蛋白的 MSTKKKPTITKQELYSL区。

一种非洲猪瘟病毒pA104R蛋白免疫优势性B细胞抗原表位肽，其氨基酸序列为MSTKKKPTITKQELYSL的全部或部分。

所述的非洲猪瘟病毒pA104R蛋白的单克隆抗体AH7或其免疫优势性B细胞抗原表位肽可用于制备如下产品：ASFV的病原学诊断产品，ASFV的血清学诊断产品，ASFV的免疫学检测产品，防治ASFV的产品。