[发明专利]Ift140基因视杆细胞条件敲除小鼠模型的构建方法及应用在审
| 申请号: | 202211322689.0 | 申请日: | 2022-10-27 |
| 公开(公告)号: | CN115777626A | 公开(公告)日: | 2023-03-14 |
| 发明(设计)人: | 睢瑞芳;朱田 | 申请(专利权)人: | 中国医学科学院北京协和医院 |
| 主分类号: | A01K67/027 | 分类号: | A01K67/027;A61K49/00 |
| 代理公司: | 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人: | 郭莲梅 |
| 地址: | 100000 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | ift140 基因 细胞 条件 小鼠 模型 构建 方法 应用 | ||
1.一种Ift140基因视杆细胞条件敲除小鼠模型的构建方法,其特征在于,其包括:敲除小鼠视网膜视杆细胞基因组中的Ift140基因。
2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述敲除小鼠视网膜视杆细胞基因组中的Ift140基因是指敲除小鼠视网膜视杆细胞基因组中的Ift140基因的外显子序列。
3.根据权利要求2所述的构建方法,其特征在于,所述敲除小鼠视网膜视杆细胞基因组中的Ift140基因是敲除小鼠视网膜视杆细胞基因组中的Ift140基因的第7号外显子序列。
4.根据权利要求1-3任一所述的构建方法,其特征在于,所述构建方法包括:采用Cre-loxP敲除技术敲除小鼠视网膜视杆细胞基因组中的Ift140基因。
5.根据权利要求4所述的构建方法,其特征在于,所述构建方法包括:将首建Ift140基因靶向的Neo阳性小鼠与flp小鼠杂交,获得去除打靶载体的Neo基因而含有两个loxP位点的flox杂合子小鼠(flox/+),然后通过flox杂合小鼠(flox/+)之间相互交配得到flox纯合小鼠(flox/flox),再将其与Rho-iCre小鼠交配,获得条件性视杆细胞Ift140基因敲除小鼠。
6.根据权利要求5所述的构建方法,其特征在于,所述首建Ift140基因靶向的Neo阳性小鼠的Ift140基因带有Neo和loxP位点;
优选的,所述首建Ift140基因靶向的Neo阳性小鼠的构建方法为:将靶向Ift140基因ES细胞系注射至野生型小鼠囊胚腔,注射后的囊胚移植到假孕小鼠子宫内,发育成熟后获得所述首建Ift140基因靶向的Neo阳性小鼠。
7.根据权利要求6所述的构建方法,其特征在于,将首建Ift140基因靶向的Neo阳性小鼠与flp小鼠杂交,进行基因型鉴定,筛选获得含有两个loxP位点的flox杂合子小鼠(flox/+)。
8.一种Ift140基因视杆细胞条件敲除小鼠模型,其特征在于,其是根据权利要求1-7任一所述的构建方法所构建出的视杆细胞条件敲除Ift140基因小鼠模型。
9.如权利要求8所述的视杆细胞条件敲除Ift140基因小鼠模型在筛选用于预防或治疗视网膜变性疾病药物中的应用。
10.如权利要求9所述的应用,其特征在于,所述视网膜变性疾病包括早发严重性视网膜变性。
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