[发明专利]一种用于培养贝莱斯芽孢杆菌YFB3-1的液体发酵培养基及方法在审
申请号: | 202211313284.0 | 申请日: | 2022-10-25 |
公开(公告)号: | CN115478037A | 公开(公告)日: | 2022-12-16 |
发明(设计)人: | 鲁耀雄;高鹏;谢进;崔新卫;谢坤英 | 申请(专利权)人: | 湖南省农业环境生态研究所 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12R1/07 |
代理公司: | 深圳峰诚志合知识产权代理有限公司 44525 | 代理人: | 张腾 |
地址: | 410125 湖南省长沙*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 培养 贝莱斯 芽孢 杆菌 yfb3 液体 发酵 培养基 方法 | ||
1.一种用于培养贝莱斯芽孢杆菌YFB3-1的液体发酵培养基,其特征在于,所述液体发酵培养基包括以下物质:
复合氨基酸7.5-15g/L
酵母粉6-12g/L
NaCl 0.75-1.5g/L
MgSO4·7H2O 0.75-1.5g/L
去离子水1L。
2.根据权利要求1所述的一种用于培养贝莱斯芽孢杆菌YFB3-1的液体发酵培养基,其特征在于,所述贝莱斯芽孢杆菌YFB3-1在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC M20221140,保藏机构地址:湖北省武汉市武昌区八一路299号。
3.根据权利要求1所述的一种用于培养贝莱斯芽孢杆菌YFB3-1的液体发酵培养基,其特征在于,所述复合氨基酸以重量份数计,由以下成分组成:甘氨酸5-25份、亮氨酸5-25份、胱氨酸5-25份、色氨酸5-25份、甲硫氨酸1-20份、丝氨酸1-20份、酪氨酸1-20份、脯氨酸0-20份、谷氨酸0-20份、天门冬氨酸0-20份。
4.根据权利要求3所述的一种用于培养贝莱斯芽孢杆菌YFB3-1的液体发酵培养基,其特征在于,所述复合氨基酸以重量份数计,由以下成分组成:甘氨酸15份、亮氨酸15份、胱氨酸15份、色氨酸15份、甲硫氨酸10份、丝氨酸10份、酪氨酸5份、脯氨酸5份、谷氨酸5份、天门冬氨酸5份。
5.一种利用权利要求1所述液体发酵培养基培养贝莱斯芽孢杆菌YFB3-1的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)菌种的活化:将贝莱斯芽孢杆菌YFB3-1进行解冻,接着用接种环挑取后划线在NA固体培养基平皿上进行培养,培养后挑选生长旺盛的单菌落连续划线2~3次,活化好贝莱斯芽孢杆菌YFB3-1。
(2)种子发酵液的制备:用接种铲取步骤(1)中所得活化好的贝莱斯芽孢杆菌YFB3-1,转接到装有灭菌冷却好的NB液体培养基三角瓶中,置于恒温振荡培养箱培养,制成种子发酵液。
(3)液体发酵培养:取步骤(2)中所得种子发酵液转接到装有灭菌冷却好的所述液体发酵培养基三角瓶中,置于恒温振荡培养箱中进行发酵培养,得到高浓度贝莱斯芽孢杆菌YFB3-1。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,步骤(1)中所述NA固体培养基的成分为:蛋白胨7.5-15g,牛肉膏2-5g,NaCl 3-6g,琼脂18-22g,去离子水1000mL;所述NA固体培养基培养温度为25-45℃,培养时间为36-72h。
7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,步骤(2)中所述NB液体培养基的成分为:蛋白胨7.5-15g,牛肉膏2-5g,NaCl 3-6g,去离子水1000mL;步骤(2)中所述恒温振荡培养箱培养温度为25-45℃,培养时间为36-72h,转速为150-210r/min。
8.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,步骤(3)中所述种子发酵液接种量为2.5%-2.8%,所述液体发酵培养基初始pH为5.0-9.0,所述恒温振荡培养箱培养温度为25-45℃,培养时间为36-72h,转速为150-210r/min。
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