[发明专利]用于检测长QT综合征致病基因KCNQ1和KCNH2的试剂及其应用

说明书

本发明涉及基因检测技术领域，具体涉及了用于检测长QT综合征致病基因KCNQ1和KCNH2的试剂，所述试剂包括引物SEQ ID NO:5至SEQ ID NO:8；与野生型KCNQ1基因参考序列相比，致病基因KCNQ1的第515‑525位的碱基缺失；与野生型KCNH2基因参考序列相比，致病基因KCNH2第679位的碱基A突变为碱基T。本发明还涉及上述试剂在制备检测试剂盒中的应用。本发明提供的致病基因KCNQ1和KCNH2可以作为临床辅助诊断的生物标志物，基于该致病基因KCNQ1和KCNH2开发的试剂及其检测试剂盒可以将携带KCNQ1 c.515_525del和KCNH2 c.679AT基因突变的患者和正常人群区分开，对长QT综合征的早期诊断、辅助临床诊断、治疗和预后均具有重要意义。

技术领域

本发明涉及基因检测技术领域，尤其涉及用于检测长QT综合征致病基因KCNQ1和KCNH2的试剂及其应用。

背景技术

长QT综合征(longQTsyndrome,LQTS)是一种心脏结构正常但心肌复极延迟的单基因遗传性心血管疾病，主要表现为心电图校正的QT间期(QTc)延长，易发尖端扭转型室速导致晕厥甚至心脏性猝死(sudden cardiac death,SCD)。LQTS临床表型多样，患者可终生无明显症状亦可幼年发生SCD。

目前报道的LQTS相关致病基因至少16个，其中明确的致病基因9个，分别编码电压门控钾、钠、钙通道蛋白及其相关调节蛋白。其中，KCNQ1(LQTS1)、KCNH2(LQTS2)和SCN5A(LQTS3)3个致病基因可解释约75％的患者，其余致病基因可解释5％～10％的患者。

LQTS主要为常染色体显性遗传，既有家族性发病病例亦有散发病例，散发病例可能与新发突变有关。KCNQ1和KCNE1除了常染色体显性遗传外，亦可由常染色体隐性遗传模式导致与耳聋相关的Jervell-Lange-Nielsen综合征。

基因检测对于患者临床诊断、危险分层、治疗及患者家属的早期预警非常重要，例如基因检测出携带≥2个致病基因突变的LQTS患者或先天耳聋的Jervell-Lange-Nielsen综合征患者SCD风险高，可积极考虑预防性植入植入型心律转复除颤器(implantablecardioverter defibrillator,ICD)，提高患者生存率。目前已发现长QT综合征致病基因KCNQ1和KCNH2基因的许多突变位点，进一步发现新的KCNQ1和KCNH2基因突变位点将有助于进一步研究长QT综合征，对长QT综合征的早期诊断，或者辅助临床诊断具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于针对上述缺陷，提供用于检测长QT综合征致病基因KCNQ1和KCNH2的试剂及其应用。

本发明目的之一在于提供用于检测长QT综合征致病基因KCNQ1和KCNH2的试剂，所述试剂包括引物SEQ ID NO:5至SEQ ID NO:8；与野生型KCNQ1基因参考序列SEQ ID NO:9相比，所述致病基因KCNQ1的第515-525位的碱基缺失，编码核苷酸序列为SEQ ID NO:1，与野生型KCNQ1基因编码蛋白的氨基酸序列SEQ ID NO:10相比，所述致病基因KCNQ1编码蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO:2；与野生型KCNH2基因参考序列SEQ ID NO:11相比，所述致病基因KCNH2第679位的碱基A突变为碱基T，编码核苷酸序列为SEQ ID NO:3，与野生型KCNH2基因编码蛋白的氨基酸序列SEQ ID NO:10相比，编码蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO:4。具体突变信息如下：

本发明目的之二在于提供上述用于检测长QT综合征致病基因KCNQ1和KCNH2的试剂在制备检测试剂盒中的应用，所述检测试剂盒包括PCR预混液、阴性对照试剂和阳性对照试剂。