[发明专利]一种M蛋白检测的方法

权利要求书

1.一种M蛋白检测的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

1)提供待测样本中免疫球蛋白轻链单电荷离子的m/z分布数据，所述轻链包括λ轻链和κ轻链；

2)结果判定：

若轻链m/z范围内具有基底窄、峰高且尖锐的质谱峰，则判定待测样本中含有M蛋白；

或，

若κ轻链:λ轻链的峰面积比值小于1.8或大于3.5，且峰形为非高斯分布，则判定待测样本中含有M蛋白；

所述轻链m/z范围内具有基底窄、峰高且尖锐的质谱峰，或κ轻链:λ轻链的峰面积比值小于1.8或大于3.5，且峰形为非高斯分布的轻链峰为M蛋白轻链峰；

若κ轻链:λ轻链的峰面积比值≧1.8或≦3.5，且峰形为高斯分布，则判定为待测样本中不含有M蛋白。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待测样本为血清样本或尿液样本，和/或，步骤2)中所述轻链m/z范围指轻链单电荷m/z为22400～24600Da。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，待测样本中免疫球蛋白轻链单电荷离子的m/z分布数据采用下列步骤获得：

I)样本还原：将待测样本用还原剂还原，得到还原样本；

II)检测：将还原样本和基质液混合后点样，利用MALDI-TOF MS分析测量待测样本中免疫球蛋白轻链和重链单电荷离子的m/z分布数据。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述待测样本稀释后再用还原剂还原；优选的，所述待测样本用水、PBS或生理盐水中的一种或多种进行稀释；

和/或，

步骤I)中所述还原剂选自二硫苏糖醇、三(2-羧乙基)膦、三(3-羟丙基)膦、β-巯基乙醇中的任一种或多种；优选的，所述还原剂的终浓度为0.02～0.08mol/L；

和/或，步骤I)中用还原剂还原的步骤为：将待测样本和还原剂混合后，20～30℃下孵育10～30分钟；

和/或，步骤II)中所述基质液选自芥子酸基质液、2，5－二羟基苯甲酸基质液或α－氰基－4－羟基肉桂酸基质液；优选的，所述基质液的终浓度为1～5mg/mL。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中将检测获得的待测样本的指纹图谱与健康人的指纹图谱叠加比较，观察在待测样本指纹图谱上轻链m/z范围内是否具有与健康人的峰形相比基底更窄、峰更高且更尖锐的质谱峰，若有，则判定为待测样本中含有M蛋白；若无，则判定为待测样本中不含有M蛋白。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中具体判定方法如下：

若κ/λ＜1.8，单电荷离子的m/z在22400～23100Da内含有非高斯分布的M蛋白轻链峰，，则判定为λ轻链型M蛋白阳性；

若κ/λ＞3.5，单电荷离子的m/z在23100～24600Da内含有非高斯分布的M蛋白轻链峰，，则判定为κ轻链型M蛋白阳性；

公式中，κ代表M蛋白κ轻链的峰面积，λ代表M蛋白λ轻链的峰面积。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中利用质谱工作站计算得到κ轻链和λ轻链的峰面积比值，和/或，利用峰形识别工具判断峰形是否为高斯分布。

8.一种M蛋白检测的装置，其特征在于，所述装置包括：

信息获取模块：用于获取待测样本中免疫球蛋白轻链和重链单电荷离子的m/z分布数据，所述轻链包括λ轻链和κ轻链；

峰形识别模块：用于分析κ轻链：λ轻链的峰面积以及峰形是否为非高斯分布；

结果判定模块：用于按照以下情况输出结果：

若κ轻链：λ轻链的峰面积比值小于1.8，且单电荷离子的m/z在22400～23100Da内含有非高斯分布的峰形，则判定待测样本中含有λ轻链型M蛋白；

若κ轻链：λ轻链的峰面积比值大于3.5，且单电荷离子的m/z在23100～24600Da内含有非高斯分布的峰形，则判定待测样本中含有κ轻链型M蛋白；

若κ轻链：λ轻链的峰面积比值≧1.8或≦3.5，且峰形为高斯分布，则判定待测样本中不含有M蛋白。