[发明专利]具有促进巨噬细胞和肾细胞增殖的四种蝉花核苷及制备方法

说明书

本发明涉及具有促进巨噬细胞和肾细胞增殖活性的四种蝉花核苷及制备方法，属于生物制品的提取制备技术领域。四种蝉花核苷分别为蝉花核苷A、蝉花核苷B、蝉花核苷C和蝉花核苷D，均为黄色油状物质，经一维和二维核磁共振、精确质谱鉴定，分别得到四种蝉花核苷的结构式。本发明通过培养蝉花真菌，然后提取分离得到四种蝉花核苷的化合物。本发明制备的四种蝉花核苷能用于制备免疫促进剂和强肾制剂，对免疫功能低下和肾病有潜在治疗作用。本发明的制备方法包括液固混合培养制备固体培养物，固体培养物中有效成分的提取、初步纯化和精制；制备方法环境友好，不受自然环境和资源影响，易实现工业化、自动化、连续化生产，应用前景广阔。

技术领域

本发明属于生物制品的提取制备技术领域，具体涉及具有促进巨噬细胞和肾细胞增殖的四种蝉花核苷及其提取、纯化、结构鉴定和活性测定。

背景技术

四种蝉花核苷分别为蝉花核苷A、蝉花核苷B、蝉花核苷C和蝉花核苷D，四种蝉花核苷均是从一种蝉花真菌(Cordyceps chanhua)培养物中分离制备得到的具有促进巨噬细胞和肾细胞增殖的新型生物活性物质。

蝉花真菌(Cordyceps chanhua)为麦角菌科(Clavicipitaceae)、虫草属(Cordyceps)的真菌，有多个同物异名：蝉虫草(Cordyceps cicadae),辛克莱蝉花(Cordyceps sinclairii)，辛克莱棒束孢(Isaria sinclairii)，蝉拟青霉(Paecilomycescicadae)和蝉棒束孢(Isaria cicadae)。是蝉花真菌感染昆虫后形成的虫草复合体，并作为冬虫夏草的代用品，具有重要经济价值。

巨噬细胞是免疫细胞。促进巨噬细胞增殖可增强免疫；促进肾细胞增殖可能在肾损伤修复和肾病治疗中发挥作用。因此具有促进巨噬细胞和肾细胞增殖的四种蝉花核苷在医药和保健品中具有广阔的应用潜力。

发明内容

为寻找新型天然高效的具有免疫增强及强肾物质，发明人通过蝉花RECF5833菌株代谢物进行活性研究，发现了蝉花真菌培养物中提取的新化合物蝉花核苷A、蝉花核苷B、蝉花核苷C和蝉花核苷D具有明显的促进巨噬细胞和肾细胞增殖的作用。

具有促进巨噬细胞和肾细胞增殖的蝉花核苷A(Chanhuauncleosides A)是从蝉花(Cordyceps chanhua)培养物中分离制备得到的，其结构式如下：

所述蝉花核苷A(Chanhuauncleoside A)为黄色油状物，其分子式为C₁₄H₁₉N₅O₆；在50.0μg/mL浓度时可使小鼠卵巢巨噬细胞增殖加快12.7倍，使肾细胞增殖加快5.0倍；

所述的蝉花核苷A在制备具有促进免疫及肾功能的保健品中有应用潜力。

具有促进巨噬细胞和肾细胞增殖的蝉花核苷B(ChanhuauncleosidesB)是从蝉花(Cordyceps chanhua)培养物中分离制备得到的，其结构式如下：

所述蝉花核苷B(Chanhuauncleoside B)为黄色油状物，其分子式为C₁₆H₂₁N₅O₇；在50.0μg/mL浓度时可使小鼠卵巢巨噬细胞增殖加快13.1倍，使肾细胞增殖加快5.5倍；

所述的蝉花核苷B在制备具有促进免疫及肾功能的保健品中有应用潜力。

具有促进巨噬细胞和肾细胞增殖的蝉花核苷C(Chanhuauncleosides C)是从蝉花(Cordyceps chanhua)培养物中分离制备得到的，其结构式如下：