[发明专利]一种检测重金属的磁微粒化学发光试剂盒

权利要求书

1.一种检测重金属的磁微粒化学发光试剂盒，其特征在于，包括如下组分：重金属抗原、抗重金属抗体、链霉亲和素包被的磁微粒、发光标记物偶联的抗IgG抗体、与发光标记物相适用的底物液、重金属基体标准溶液、反应稀释液以及洗涤液。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述重金属抗原和抗重金属抗体为生物素化重金属抗原和抗重金属抗体或重金属抗原和生物素化抗重金属抗体。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述生物素化重金属抗原为生物素和重金属抗原形成的复合物；所述重金属抗原由重金属、重金属螯合剂、载体蛋白偶联形成；所述生物素化抗重金属抗体为生物素和抗重金属抗体偶联形成复合物；

所述重金属螯合剂为乙二胺四乙酸、二乙基三胺五乙酸、1，4，7，10-四氮杂环十二烷-1，4，7，10-四羧酸、2-(4-氨基苄基)-二亚乙基三胺五乙酸、1-(4-异硫氰苄基)乙烯基二胺-N,N,N,N-四乙酸中的一种或多种；所述载体蛋白为卵清蛋白、血清白蛋白或锁钥蓝蛋白；所述生物素化抗重金属抗体为生物素、抗重金属抗体形成的复合物。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述抗重金属抗体为单克隆抗体或多克隆抗体，所述单克隆抗体或多克隆抗体经辛酸-硫酸铵法纯化。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述链霉亲和素包被的磁微粒由链霉亲和素与磁微粒偶联制备，所述磁微粒以四氧化三铁或三氧化二铁超顺磁性材料为内核，外围包覆聚苯乙烯或葡聚糖，通过物理或化学的方法活化使磁微粒表面产生氨基、甲苯磺酰基、羧基或环氧基基团；所述磁微粒的粒径为1～2μm。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述发光标记物偶联的抗IgG抗体中的发光标记物为碱性磷酸酶、吖啶酯或鲁米诺；所述发光标记物偶联的抗IgG抗体中的抗IgG抗体为抗重金属抗体同源生产的可识别的抗体，所述抗IgG抗体的浓度为0.01～1mg/mL。

7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述重金属基体标准溶液是由0～0.5mg/kg不同浓度梯度的匹配粮食有证标准物质，采用稀酸提取的方式制得的工作标准曲线；所述稀酸提取液为2～6％硝酸溶液。水样标准溶液是由0～2ng/mL不同浓度绘制成工作标准曲线。

8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述反应稀释液由0.01～1mM Tris缓冲液、0.01～1mM重金属螯合剂、0.08～0.12％吐温、0.4～0.6％牛血清白蛋白、0.01-1M pH调节剂组成，所述重金属螯合剂为乙二胺四乙酸、二乙基三胺五乙酸、1，4，7，10-四氮杂环十二烷-1，4，7，10-四羧酸、2-(4-氨基苄基)-二亚乙基三胺五乙酸、1-(4-异硫氰苄基)乙烯基二胺-N,N,N,N-四乙酸中的一种或多种；所述pH调节剂为氢氧化钠、氢氧化钾、氨水、三羟甲基氨基甲烷及其盐酸盐、盐酸、硝酸中的一种或多种。

9.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述洗涤剂为0.01～0.02M Tris-HCl缓冲液、0.1～0.2％吐温-20组成。

10.根据权利要求9所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括反应管；所述反应管的材料为透明聚苯乙烯、聚乙烯、聚丙烯或玻璃。