[发明专利]一种适用于大花红景天组培苗的生产方法在审
| 申请号: | 202211272354.2 | 申请日: | 2022-10-18 |
| 公开(公告)号: | CN116616173A | 公开(公告)日: | 2023-08-22 |
| 发明(设计)人: | 张力鹏;宋文芹;武美 | 申请(专利权)人: | 天津商业大学 |
| 主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00;A01G7/04 |
| 代理公司: | 重庆市信立达专利代理事务所(普通合伙) 50230 | 代理人: | 杨逍 |
| 地址: | 300000 *** | 国省代码: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 适用于 花红 景天 组培苗 生产 方法 | ||
1.一种适用于大花红景天组培苗的生产方法,其特征在于,所述利用无性组织培养方法通过调节不同培养阶段的光质、添加半胱氨酸诱导分化结合微创法,对大花红景天叶片外植体的愈伤组织进行诱导、分化培养和生根培养,建立大花红景天组织快繁体系,并进行大花红景天组织快繁体系的移栽,得到大花红景天组培苗。
2.如权利要求1所述适用于大花红景天组培苗的生产方法,其特征在于,所述适用于大花红景天组培苗的生产方法包括以下步骤:
步骤一,采集大花红景天种子,利用NaClO对所述大花红景天种子进行消毒,并将消毒后的所述大花红景天种子平铺于MS培养基上在全光谱光照下进行培养;
步骤二,利用无菌解剖针将具完整叶片的基部进行轻微划伤,采集大花红景天叶片为外植体;
步骤三,将采集的叶片正向朝上平铺于原代培养基上并在全光谱结合20%红橙光以及20%蓝紫光的光照下诱导形成大花红景天愈伤组织;
步骤四,将得到的大花红景天愈伤组织接种于分化培养基上于全光谱结合75%蓝紫光的光照下进行大花红景天的分化与继代培养,得到大花红景天再生苗;
步骤五,将得到的大花红景天再生苗小心切下后转接至生根培养基中于全光谱光照下进行大花红景天的生根培养,得到大花红景天完整再生苗;
步骤六,将得到的大花红景天完整再生苗进行移栽并在50%红橙光与50%蓝紫光的光照培养下得到大花红景天组培苗。
3.如权利要求2所述适用于大花红景天组培苗的生产方法,其特征在于,所述红橙光波长为600~700nm;所述蓝紫光波长为400~500nm。
4.如权利要求2所述适用于大花红景天组培苗的生产方法,其特征在于,所述步骤一中,培养包括:于波长为350-770nm的全光谱的光照、光照强度2000-2500lux、光照时间16h/d、26℃下培养大花红景天种子30日。
5.如权利要求2所述适用于大花红景天组培苗的生产方法,其特征在于,所述步骤三中,将采集的叶片正向朝上平铺于原代培养基上并在全光谱结合20%红橙光以及20%蓝紫光的光照下诱导形成大花红景天愈伤组织包括:
将采集的大花红景天的叶片正向朝上平铺于原代培养基上于22℃、全光谱结合20%红橙光以及20%蓝紫光的光照、光照时间20h/d、光照强度6000-8000lux下进行大花红景天叶片的原代培养,每30d继代一次,直至外植体完全脱分化诱导产生胚性愈伤组织。
6.如权利要求2所述适用于大花红景天组培苗的生产方法,其特征在于,所述原代培养基由MS+2.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA组成;所述原代培养基中蔗糖含量为3%、琼脂含量为4.5g/L;所述原代培养基pH为5.8。
7.如权利要求2所述适用于大花红景天组培苗的生产方法,其特征在于,所述步骤四中,大花红景天的分化与继代培养包括:
将得到的大花红景天愈伤组织接种到分化培养基上于26℃、全光谱结合75%波长400~500nm蓝紫光的光照、光照周期16h/d,光照强度6000-8000lux下培养30-50d,得到具备芽点的大花红景天愈伤组织;
将得到的具备芽点的大花红景天愈伤组织接入新继代培养基中于26℃、全光谱结合75%波长400~500nm蓝紫光的光照、光照时间16h/d、光照强度6000-8000lux下继代培养60d得到大花红景天再生苗;
所述大花红景天的分化与继代培养期间每30d继代一次。
8.如权利要求2所述适用于大花红景天组培苗的生产方法,其特征在于,所述步骤五中,将得到的大花红景天再生苗小心切下后转接至生根培养基中于全光谱光照下进行大花红景天的生根培养,得到大花红景天完整再生苗包括:
将得到的大花红景天再生苗在保证再生苗的伤口整齐的基础上使用较锋利的刀片或剪刀小心切下后转接至生根培养基中于26℃、全光谱光照、光照时间16h/d、光照强度2000-2500lux下培养30d得到大花红景天完整再生苗。
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