[发明专利]一种二阶段发酵米糠生产γ-胺基丁酸的方法

权利要求书

1.一种二阶段发酵米糠生产γ-胺基丁酸的方法，其特征在于：所述方法步骤如下：

步骤1、往米糠中接种米糠质量各5％的米曲菌(Aspergillus oryzae)BCRC 30120、米曲菌(Aspergillus oryzae)BCRC30235和泡盛曲霉(Aspergillus awamori)BCRC32175菌株菌液，然后再加入米糠质量35％～45％的水，在25～28℃下固态发酵72～84小时，得到一阶固态发酵产物；

步骤2、将步骤1米糠的一阶固态发酵产物灭菌冷却至35～40℃，再接种米糠质量各5％的短乳杆菌(Lactobacillus brevis)BCRC12187、短乳杆菌(Lactobacillus brevis)BCRC12310、乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis subsp.lactis)BCRC12312以及长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)BCRC14661菌株菌液，再加入米糠质量80％～90％的水，在38～40℃下液态发酵48～60小时，即得含有γ-胺基丁酸的二阶液态发酵液。

2.根据权利要求1所述的一种二阶段发酵米糠生产γ-胺基丁酸的方法，其特征在于：所述米糠为稻米经过碾米加工之后产生的米糠；或为糙米、发芽糙米经过微生物发酵之后产生的渣。

3.根据权利要求1所述的一种二阶段发酵米糠生产γ-胺基丁酸的方法，其特征在于：所述步骤1中米曲菌(Aspergillus oryzae)BCRC 30120、米曲菌(Aspergillus oryzae)BCRC30235菌液的活化和培养过程如下：

步骤1.1活化菌株：将米曲菌(Aspergillus oryzae)BCRC 30120和米曲菌(Aspergillus oryzae)BCRC 30235菌株接种于第一培养基中，24±2℃活化培养48h，制得活化菌株；

步骤1.2菌株一次放大：将活化后的菌株接种于新的第一培养基中，在24±2℃放大培养24h，得一次放大菌液；

步骤1.3菌株二次放大：最后将一次放大菌液接种于第二培养基中，于24±2℃放大培养12h，得米曲菌菌液；

所述第一培养基中：马铃薯丁200g，葡萄糖20g，水1L；

所述第二培养基中：发芽糙米发酵液500g，水1L；

所述发芽糙米发酵液的制备方法如下：糙米清洗后浸渍1天，滤去水份后，夏天静置4-6小时或冬天静置8-12小时进行发芽，得到发芽糙米；将发芽糙米加水在100～105℃下蒸煮1小时，得到煮熟发芽糙米；最后将煮熟发芽糙米冷却后，倒入发酵桶中，添加糙米质量20-30％的水后，接种分别为糙米质量的1-3％的糖化菌、液化菌、米曲菌，恒温55～65℃下发酵11～12小时，得发芽糙米发酵液；最后打浆或乳化，在85℃下灭菌45～60分钟，即可。

4.根据权利要求3所述的一种二阶段发酵米糠生产γ-胺基丁酸的方法，其特征在于：所述步骤1中泡盛曲霉(Aspergillus awamori)BCRC32175的活化和培养过程如下：

步骤1.4活化菌株：将泡盛曲霉(Aspergillus awamori)BCRC32175菌株接种于第三培养基中，25±2℃活化培养48h，制得活化菌株；

步骤1.5菌株一次放大：将活化后的菌株接种于新的第三培养基中，在25±2℃放大培养24h，得一次放大菌液；

步骤1.6菌株二次放大：最后将一次放大菌液接种于第二培养基中，于25±2℃放大培养12h，得泡盛曲霉菌液；

所述第三培养基中：葡萄糖20g，蛋白胨1g，麦芽糖20g，水1L。

5.根据权利要求1所述的一种二阶段发酵米糠生产γ-胺基丁酸的方法，其特征在于：所述步骤2中，将米糠的一阶固态发酵产物在85℃下灭菌45分钟。