[发明专利]一种大肠杆菌表面展示系统的构建方法在审
| 申请号： | 202211258645.6 | 申请日： | 2022-10-14 |
| 公开（公告）号： | CN116064628A | 公开（公告）日： | 2023-05-05 |
| 发明（设计）人： | 任磊;王孝宇;陈昊翔;王苗 | 申请（专利权）人： | 厦门大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/62;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 厦门市首创君合专利事务所有限公司 35204 | 代理人： | 游学明 |
| 地址： | 361000 *** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 大肠杆菌 表面 展示 系统 构建 方法 | ||
1.一种大肠杆菌表面展示系统的构建方法，包括如下步骤：
1)构建第一质粒，所述的第一质粒具有SpyTag和待表达蛋白的融合蛋白基因；
2)构建第二质粒，所述的第二质粒具有INPNC和SpyCatcher基因；
3)将第一质粒和第二质粒分别转入同一大肠杆菌，获得表面展示待表达蛋白的工程菌。
2.根据权利要求1所述的一种大肠杆菌表面展示系统的构建方法，其特征在于：所述第一质粒为表达SpyTag-待表达蛋白的融合蛋白基因插入质粒pSB1C3而得。
3.根据权利要求1所述的一种大肠杆菌表面展示系统的构建方法，其特征在于：所述的第二质粒为INPNC-SpyCatcher基因插入质粒pSB3K3而得。
4.根据权利要求1所述的一种大肠杆菌表面展示系统的构建方法，其特征在于：所述的大肠杆菌为大肠杆菌BL21(DE3)。
5.根据权利要求1所述的一种大肠杆菌表面展示系统的构建方法，其特征在于：所述第一质粒和第二质粒均具有常启动子。
6.根据权利要求1所述的一种大肠杆菌表面展示系统的构建方法，其特征在于：所述第二质粒的序列为SEQ ID NO：1。
7.根据权利要求1所述的一种大肠杆菌表面展示系统的构建方法，其特征在于：所述的待表达蛋白为eGFP,HisTag-SpyTag-eGFPCDS序列见SEQ ID NO：2。
8.根据权利要求1-7任一项所述的一种大肠杆菌表面展示系统的构建方法，其特征在于：还包括步骤4)工程菌培育，待表达蛋白被表达。
9.如权利要求1-7任一项构建方法构建得到的大肠杆菌表面展示系统。
10.根据权利要求9所述的大肠杆菌表面展示系统，其特征在于：无需诱导即可表达蛋白。
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