[发明专利]一株龙胆内生真菌促生抗病发酵液及其制备方法和应用

说明书

本发明属于植物内生真菌及其代谢产物生物防治技术领域，具体涉及一株龙胆内生真菌促生抗病发酵液及其制备方法和应用。本发明所述发酵液是由龙胆内生真菌木霉属内生菌木霉(Trichoderma sp.)3711菌种活化和发酵培养的步骤制备得到的。经抑菌和促生实验证明，本发明所述发酵液具有显著的广谱抗植物病原菌和促进植物(特别是农作物)生长的两方面作用。此外，本发明所述以从龙胆中分离得到的木霉属内生菌木霉(Trichoderma sp.)3711为基础制备得到的发酵液制备方法简单、制备成本低廉，具有良好的经济价值和广阔的市场前景。

技术领域

本发明属于植物内生真菌及其代谢产物生物防治技术领域，具体涉及一株龙胆内生真菌促生抗病发酵液及其制备方法和应用。

背景技术

目前，化学农药和化肥大量使用存在诸多弊端，如环境污染日益严重、病害虫抗性显著提高、人畜安全受到威胁等等，产生的生态问题层出不穷，且目前公众对保障食品安全的呼声越来越高。因此，开发安全高效绿色环保的新型农药和肥料迫在眉睫。

微生物发酵工艺简单、成本相对低廉、不易使病虫害产生抗性、对人和环境温和，已经成为开发新型生物农药和肥料中的热点。作为微生物之一的植物内生菌在开发新型农药和肥料方面因具有极为广阔的前景而备受瞩目。植物内生菌是指与宿主植物具有协同进化作用且与宿主植物已经形成互惠共生关系的一类真菌。植物内生真菌与宿主植物的互惠共生关系表现为：宿主植物产生的光合产物可为内生真菌提供营养；内生真菌产生的代谢产物可以刺激宿主植物的生长发育，同时可以提高植物的抗逆性。因此，植物内生菌的代谢产物为发现新化合物、筛选新药物等，提供丰富的原料和广阔的空间，因此植物内生菌已成为多领域多学科的研究热点。

龙胆是龙胆科植物条页龙胆Gentiana manshurica Kitag.、龙胆Gentianascabra Bge.、三花龙胆Gentiana trifloral Pall.或坚龙胆Gentiana rigescensFranch. 的干燥根和根茎。国内外研究者从龙胆中分离得到了多种成分，比如：裂环烯醚萜苷类、多糖类、生物碱类等。龙胆味苦、性寒，为清肝胆湿热，泻下焦郁火之常用中药。在临床上，龙胆常用于利胆、健胃、保肝、中枢兴奋等作用，其抗炎、抗菌作用也是很明显。根据此前的研究结果推测，在龙胆中可能存在具有较强的抗植物病原菌活性的内生真菌，并且其次生代谢产物可能具有促生作用。因此，研究龙胆内生真菌对新时期农药和肥料的开发和使用具有理论和实际上的参考价值。

但是，目前尚无来自龙胆内生真菌的同时具有促生和抗病作用的农药和植物生长助剂。

发明内容

为了解决上述技术问题以及填补相关领域的技术空白，本发明以从龙胆中分离得到的木霉属内生菌木霉(Trichoderma sp.)3711为基础，通过发酵培养得到的代谢物，并将其开发成主要用于广谱抗植物病原菌和促进植物生长的产品。

具体地，通过以下几个方面的技术方案实现了本发明：

在第一个方面中，本发明提供了一种龙胆内生真菌，所述龙胆内生真菌用于制备具有抗植物病原菌和促进植物生长作用的发酵液，所述龙胆内生真菌是木霉属内生菌木霉(Trichoderma sp.3711)，所述木霉(Trichoderma sp.3711) 的微生物保藏号为CCTCC NO:M 20211203，保藏时间为2021年9月24日，保藏地点为中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏单位地址为中国武汉武汉大学。

在第二个方面中，本发明提供了一种具有抗植物病原菌和促进植物生长作用的发酵液，所述发酵液由上述第一个方面所述的龙胆内生真菌制备得到。

作为可选的方式，在所述发酵液中，所述植物病原菌包括以下一种或多种：瓜果腐霉病原菌(FM)(Pythium aphanidermatum)、水稻纹枯病原菌(WK) (Rhizoctonia solani Kühn)、黄瓜枯萎病原菌(KW)(Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum)。