[发明专利]一种海丰莕菜组织培养快速繁殖方法

说明书

本发明专利公开了一种海丰莕菜组织培养快速繁殖方法，其方法包括如下步骤：外植体选取、外植体消毒方法、幼芽诱导、丛生芽的诱导、继代培养、生根培养、炼苗移栽，选取海丰莕菜带芽茎段作为外植体，将海丰莕菜带芽茎段用清水冲洗干净，该方法选取海丰莕菜带芽茎段作为外植体进行培养，并且在不同的培养阶段中选取不同的培养基进行培养，最终诱导率100％，增殖倍数达200‑300倍，使组培苗的生根率达到百分之百，并且本发明还设计了炼苗移栽方案，能够保证组培苗在移栽的过程中达到炼苗成活率100％，该发明采用科学配制的生根培养基，可使生根率为100％，不仅生根时间短，而且苗粗壮、根粗根长、根多，有利于组培苗炼移栽，提高成活率。

技术领域

本发明专利涉及植物繁殖技术领域，具体为一种海丰莕菜组织培养快速繁殖方法。

背景技术

海丰莕菜是莕菜属植物，海丰莕菜花期长，叶片浮水，花挺出水面，黄色色彩鲜艳，可作为园林绿化植物，根据世界自然保护联盟2012年对物种濒危等级的划分标准，海丰莕菜为中国特有的水生植物极度濒危物种。

海丰莕菜繁殖一般有无性繁殖和有性繁殖兼用，通常是播种和分株繁殖，海丰莕菜为濒危物种，播种种苗发芽率低，自然分株繁殖速度慢，为了加速对海丰莕菜种苗扩繁，最好的育种方法是组织培养快繁技术，该技术为保护濒危物种海丰莕菜扩繁具有重要的意义。

发明专利内容

本发明专利的目的在于提供一种海丰莕菜组织培养快速繁殖方法，为实现上述目的，本发明专利提供如下技术方案：一种海丰莕菜组织培养快速繁殖方法，其方法包括如下步骤：

S1外植体选取：选取海丰莕菜带芽茎段作为外植体；

S2外植体消毒方法：将海丰莕菜带芽茎段用清水冲洗干净，再用洗衣粉水洗过，用自来水冲洗30min左右，置于无菌操作台消毒，然后使用无菌水清洗3次后，使用杀菌剂溶液浸泡消毒60min，清洗3～5次待用；

S3幼芽诱导：将消毒好的海丰莕菜带芽茎段芽用手术刀切去外面接触消毒液的材料，置于固体培养基上，置于25～28℃条件下按培养一周，转置LED照明灯光照10～12小时/天；

S4丛生芽的诱导：窃取萌发的幼芽，接入到丛生芽诱导培养基中，置于LED照明灯光照10～12小时/天；

S5继代培养：将丛生芽苗切为叶片、茎段和带愈伤的小丛芽接种到增值培养基中，置于LED照明灯光照10～12小时/天；

S6生根培养：选择生长一致、健壮的丛生芽苗切取单株或小丛芽苗接种到生根培养基中，置于LED照明灯光照16小时/天；

S7炼苗移栽：将海丰莕菜瓶装生根组培苗移到折光处一周左右，慢慢移至光线较好的地方炼苗1周左右，将炼好的组培苗取出洗净根部培养基，置于装有红泥土的空塑料花盆中，浇水后置于自然光下培养。

优选的，所述S2中，消毒溶液采用75％浓度的酒精，消毒时间为1min。

优选的，所述S2中，杀菌剂溶液为2％的S206杀菌剂，所述外植体消毒后的污染率为9％。

优选的，所述S3中，固体培养基为添加MS+0.5mg/L6-BAl+0.5mg/LIAA的固体培养基，所述LED照明灯的光照强度为1000-1200lux，且在温度25～28℃条件下培养。

优选的，所述S4中，丛生芽诱导培养基为MS+0.5mg/L6-BAl+0.5mg/LIAA培养基，所述丛生芽诱导时，LED照明灯的光照强度为1000-1200lux，且在温度25～28℃条件下培养。

优选的，所述S5中，增值培养基为MS+1.0mg/L6-BAl+0.5mg/LIAA培养基，所述继代培养使，LED照明灯的光照强度为1000-1200lux，且在温度25～28℃条件下培养。