[发明专利]一种用于蛋白印迹法的膜条孵育方法及含有其的检测方法在审
| 申请号: | 202211219101.9 | 申请日: | 2022-09-30 |
| 公开(公告)号: | CN115629209A | 公开(公告)日: | 2023-01-20 |
| 发明(设计)人: | 刘婷;何兴兴;禅艳;黄松;陈涛 | 申请(专利权)人: | 贵州金域医学检验中心有限公司 |
| 主分类号: | G01N33/543 | 分类号: | G01N33/543;G01N33/558;G01N33/531 |
| 代理公司: | 深圳腾文知识产权代理有限公司 44680 | 代理人: | 刘洵 |
| 地址: | 550016 贵州省贵阳市贵阳国家*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 用于 蛋白 印迹 孵育 方法 含有 检测 | ||
本发明公开了一种用于蛋白印迹法的膜条孵育方法及含有其的检测方法,属于免疫印迹技术领域。膜条孵育方法包括:采用膜条孵育装置对膜条孵育,将膜条放置到孵育槽内;向孵育槽加缓冲洗液和封闭液,吹动液体流动进行膜封闭;向孵育槽加待检测样本,吹动液体流动进行样本孵育;向孵育槽加缓冲洗液,吹动液体流动进行洗膜;向孵育槽加缓冲洗液和酶结合物,吹动液体流动进行酶结合;向孵育槽加缓冲洗液,吹动液体流动进行洗膜;向孵育槽加蒸馏水和显色液,对膜条遮光并吹动液体流动进行避光显色;向孵育槽加蒸馏水,吹动液体流动进行终止显色;且上述每一工序操作完成后吸干孵育槽内的液体。本发明的膜条孵育方法确保膜条与检测用液充分接触以及反应。
技术领域
本发明涉及免疫印迹技术领域,尤其涉及一种用于蛋白印迹法的膜条孵育方法及含有其的检测方法。
背景技术
免疫印迹法又称蛋白质印迹,是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测;另外,免疫印迹法具有分析容量大、敏感度高、特异性强等优点,在检测蛋白质特性、表达与分布得到广泛使用。
但是,在使用现有的膜条孵育方法以及现有的免疫印迹仪进行孵育的过程中,需要通过免疫印迹仪上的摇床机构来对孵育盘进行摇动,以有利于孵育盘上的孵育槽内的膜条与检测用液充分接触以及充分反应,在摇动孵育盘的过程中,由于摇床在竖直方向进行往复摇摆且摇摆的角度不便于控制,容易导致检测用液从孵育槽内外溢,浪费检测用液且污染检测环境;而且,随着使用时长的增加,摇床机构摇动的精度难以保证,容易使得摇动不充分或过度摇动。由此,亟需一种有利于确保膜条与检测用液充分接触以及充分反应且能够避免检测用液外溢的膜条孵育方法。
发明内容
本发明的目的在于克服上述现有技术的至少一个不足,提供一种有利于确保膜条与检测用液充分接触以及充分反应且能够避免检测用液外溢的用于蛋白印迹法的膜条孵育方法;另外,还提供一种用于蛋白印迹法的检测方法。
本发明解决上述技术问题的技术方案如下:一种用于蛋白印迹法的膜条孵育方法,包括:
采用膜条孵育装置来对膜条进行孵育,所述孵育装置包括基座和孵育盘,所述基座上设有孵育盘放置部,所述孵育盘水平放置在所述孵育盘放置部上,所述孵育盘上间隔设有多个用于对所述膜条进行孵育的孵育槽;
将待进行检测的所述膜条分别放置到所述孵育槽内;
分别向多个所述孵育槽内添加缓冲洗液和封闭液,润湿所述膜条,吹动孵育槽内的液体流动进行膜封闭第一时长;
分别向多个所述孵育槽内添加待检测样本,吹动孵育槽内的液体流动进行样本孵育第二时长,然后吸干所述孵育槽内的液体;
分别向多个所述孵育槽内添加缓冲洗液,吹动孵育槽内的液体流动进行洗膜第三时长,然后吸干所述孵育槽内的缓冲洗液;
分别向多个所述孵育槽内添加缓冲洗液和酶结合物,吹动孵育槽内的液体流动进行酶结合第四时长,然后吸干所述孵育槽内的液体;
分别向多个所述孵育槽内添加缓冲洗液,吹动孵育槽内的液体流动进行洗膜第五时长,然后吸干所述孵育槽内的缓冲洗液;
分别向多个所述孵育槽内添加蒸馏水和显色液,对所述膜条遮光并吹动孵育槽内的液体流动进行避光显色第六时长,然后吸干所述孵育槽内的液体;
分别向多个所述孵育槽内添加蒸馏水,吹动孵育槽内的液体流动进行终止显色第七时长,然后吸干所述孵育槽内的蒸馏水;
其中,吹动孵育槽内的液体流动为通过吹风扰动装置向所述孵育槽吹风并使得所述孵育槽内的液体相对放置在所述孵育槽内的所述膜条流动。
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