[发明专利]一种基于氟硼二吡咯染料的高选择性硫化氢比率荧光探针及其制备和应用

权利要求书

1.一种基于不对称氟硼二吡咯染料的比率荧光探针，其特征在于，所述比率荧光探针的结构式如下：

2.一种如权利要求1所述的比率荧光探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)2,4-二甲基-3-乙基吡咯和5-氯-2-醛基吡咯通过不对称氟硼二吡咯方法得到化合物3-氯取代氟硼二吡咯；

(2)步骤(1)得的化合物进行一氯化碘的碘化反应，接着与2-甲醛苯基硼酸的Suzuki偶联反应，反应结束后处理得到所述的比率荧光探针。

3.一种如权利要求1所述的比率荧光探针在硫化氢检测中的应用，其特征在于，所述比率荧光探针应用于硫化氢的光谱响应或细胞成像。

4.根据权利要求3所述的比率荧光探针在硫化氢检测中的应用，其特征在于，所述的荧光探针是对硫化氢的光谱响应。

5.根据权利要求3或4所述的比率荧光探针在硫化氢检测中的应用，其特征在于，所述的荧光探针对硫化氢的光谱响应的检测，具体方法如下：

将所述的荧光探针配置成测试溶液，然后加入待测样品，测定测试溶液前后的吸收光谱，如果吸收光谱明显红移，溶液颜色从橙色变为紫色，则说明待测样品中存在硫化氢。

6.根据权利要求3或4所述的比率荧光探针在硫化氢检测中的应用，其特征在于，所述的荧光探针对硫化氢的光谱响应的检测，具体方法如下：

(1)将所述的荧光探针配置成测试溶液，然后加入待测样品，观察其荧光光谱变化；

(2)计算得到荧光强度比值I_594nm/I_542nm，根据荧光强度比值I_594nm/I_542nm确定硫化氢的浓度，根据3σ/k方法，计算检测限。

7.根据权利要求6所述的比率荧光探针在硫化氢检测中的应用，其特征在于，所述测试溶液的配制方法如下：

将DMSO/PBS(v/v,1:1,pH 7.4)加入到所述荧光探针中，配置成浓度为5μmol/L的测试溶液。

8.根据权利要求3或4所述的比率荧光探针在硫化氢检测中的应用，其特征在于，所述的荧光探针用于细胞内荧光成像测试，具体方法如下：将待测细胞用包括探针的新鲜无FBS培养基进行孵化，然后PBS洗涤三次，进行共聚焦细胞成像检测；

共聚焦细胞成像检测时，激发波长分别为488nm和543nm，绿色通道收集波长为510-560nm，红色通道收集波长为570-630nm；

将探针在HeLa细胞中孵育30分钟后，绿色通道(510-560nm)中具有强烈的荧光信号，而红色通道(570-630nm)中几乎没有信号；此外，细胞在培养基中进一步与NaHS(300μM)孵育60分钟，路色通道中的荧光信号减弱，而红色通道中的发射信号明显增强。