[发明专利]调控桃中桦木醇合成的PpCYP716A1基因及应用在审
申请号: | 202211208298.6 | 申请日: | 2022-09-30 |
公开(公告)号: | CN115976062A | 公开(公告)日: | 2023-04-18 |
发明(设计)人: | 王力荣;王君秀;李勇;曹珂;朱更瑞;王新卫;陈昌文;方伟超;吴金龙 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院郑州果树研究所 |
主分类号: | C12N15/53 | 分类号: | C12N15/53;C12N9/02;C12N15/84;A01H5/00;A01H6/74 |
代理公司: | 郑州中鼎万策专利代理事务所(普通合伙) 41179 | 代理人: | 徐文婷 |
地址: | 450000 河南*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 调控 桦木 合成 ppcyp716a1 基因 应用 | ||
1.调控桃中桦木醇合成的PpCYP716A1基因,其特征在于,所述PpCYP716A1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的PpCYP716A1基因,其特征在于,所述PpCYP716A1基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2。
3.一种含有如权利要求1所述PpCYP716A1基因的过表达载体。
4.根据权利要求3所述的过表达载体,其特征在于,所述过表达载体的启动子为CaMV35S。
5.根据权利要求3所述的过表达载体,其特征在于,所述过表达载体的骨架载体为pRI101-AN载体。
6.一种构建如权利要求3所述过表达载体的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤S1:以桃叶片的cDNA为模板,采用如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的引物,PCR扩增得到目的片段;
步骤S2:将所述目的片段插入线性化的pRI101-AN载体;
步骤S3:将插入目的片段的pRI101-AN载体转化至大肠杆菌,并进行抽提,得到所述过表达载体。
7.PpCYP716A1基因在调控桃中桦木醇合成中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,PpCYP716A1基因可提高桃中桦木醇含量。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,具体方法为:所述PpCYP716A1基因与载体pRI101-AN正向连接后得到pRI101-PpCYP716A1重组表达载体,将所述pRI101-PpCYP716A1重组表达载体转化到DH5α大肠杆菌中,筛选阳性菌提取质粒,将测序验证过表达载体中的PpCYP716A1基因序列正确的质粒转化农杆菌菌株GV3101,将配制好的农杆菌侵染液注射到桃果肉中,黑暗培养24h后,16h光照/8h黑暗培养3-4天。
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