[发明专利]一种地顶孢霉重组菌株及其发酵方法有效

专利信息
申请号: 202211192537.3 申请日: 2022-09-28
公开(公告)号: CN115786141B 公开(公告)日: 2023-08-18
发明(设计)人: 桂向东;俆自奥;李晓祥 申请(专利权)人: 合肥迈可罗生物工程有限公司
主分类号: C12N1/15 分类号: C12N1/15;C12N15/80;C12N15/60;C12P13/00;A23K10/18;C12R1/645
代理公司: 北京中普鸿儒知识产权代理有限公司 11822 代理人: 林桐苒
地址: 230601 安徽省合肥市经*** 国省代码: 安徽;34
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摘要:
搜索关键词: 种地 顶孢霉 重组 菌株 及其 发酵 方法
【权利要求书】:

1.一种地顶孢霉重组菌株,其特征在于:

所述的地顶孢霉重组菌株表达重组蛋白质,其启动子为黑曲霉3-磷酸甘油醛脱氢酶基因启动子;

所述的重组蛋白质的基因整合到地顶孢霉的染色体上,其插入位点为18s rDNA的重复序列;

所述的地顶孢霉重组菌株表达的重组蛋白质为黑曲霉的谷氨酸脱羧酶。

2.根据权利要求1所述的地顶孢霉重组菌株,其特征在于,重组蛋白黑曲霉谷氨酸脱羧酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.一种权利要求1所述的地顶孢霉重组菌株的发酵方法,其特征在于,所述的发酵方法包括如下步骤:

(1)发酵所述的地顶孢霉重组菌株;

(2)发酵到一定时间后,在发酵液中流加谷氨酸溶液,继续培养以将谷氨酸转化为γ-氨基丁酸;或将发酵液接种到含谷氨酸的固体培养基中,并继续培养以将谷氨酸转化为γ-氨基丁酸。

4.根据权利要求3所述的发酵方法,其特征在于:步骤(1)中,所述的发酵的温度为23-27℃,通气量为1.5-3v/v,搅拌转速为150-250rpm。

5.根据权利要求3所述的发酵方法,其特征在于:步骤(2)中,所述的一定时间为24-48小时。

6.根据权利要求3所述的发酵方法,其特征在于:步骤(2)中,所述的流加谷氨酸溶液的浓度为0.15-0.25M,1.5-2.5小时内总流加体积为发酵液体积的20%-50%,流加的同时升高发酵温度至28-32℃,流加完毕再发酵转化1.5-2.5小时;

或将发酵液按5%-20% v/wt比例接种于含3-6 wt%谷氨酸的固体培养基,保持温度23-25℃、空气湿度70-90%,培养84-120小时。

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