[发明专利]妥布霉素检测试剂盒

权利要求书

1.一种妥布霉素检测试剂盒，其包含：

第一试剂，所述第一试剂包含：

-底物、

-妥布霉素抗体、

-缓冲液；

第二试剂，所述第二试剂包含：

-偶联物、

-缓冲液；

所述偶联物是6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体与妥布霉素或妥布霉素衍生物按照摩尔比1：1至1：3偶联而成；

相较于假肠膜明串珠菌的野生型6-磷酸葡萄糖脱氢酶，所述6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体包含以下突变的组合：56C、306C和454C；

优选地，所述妥布霉素衍生物是式I所示：

其中，

m为0至20的整数；

X选自以下任一种：马来酰亚胺、溴乙酰基、乙烯基砜、氮丙啶。

2.根据权利要求1所述的妥布霉素检测试剂盒，所述6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体是SEQID No.2所示。

3.根据权利要求1所述的妥布霉素检测试剂盒，所述摩尔比是1:3。

4.根据权利要求1所述的妥布霉素检测试剂盒，其中m为1至10的整数。

5.根据权利要求4所述的妥布霉素检测试剂盒，其中m为1至6的整数。

6.根据权利要求1所述的妥布霉素检测试剂盒，其中X是马来酰亚胺。

7.根据权利要求1所述的妥布霉素检测试剂盒，其还包含校准品，所述校准品包含10mM至500mM缓冲液、已知浓度的妥布霉素。

8.根据权利要求1或7所述的妥布霉素检测试剂盒，其还包含质控品，所述质控品包含10mM至500mM缓冲液、已知浓度的妥布霉素。

9.根据权利要求1所述的妥布霉素检测试剂盒，其包含：

第一试剂，其包含：

10mM至500mM缓冲液、

5mM至25mM底物、

0.01μg/L至1mg/L妥布霉素抗体、

10mM至300mM NaCl、

0.1g/L至5g/L稳定剂、

0.1g/L至5g/L表面活性剂、

0.1g/L至5g/L防腐剂；

第二试剂，其包含：

10mM至500mM缓冲液、

0.01μg/L至1mg/L所述偶联物、

0.1g/L至5g/L稳定剂、

0.1g/L至5g/L表面活性剂、

0.1g/L至5g/L防腐剂；

所述缓冲液选自以下的一种或组合：氨基丁三醇缓冲液、磷酸盐缓冲液、Tris-HCl缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、巴比妥缓冲液、甘氨酸缓冲液、硼酸盐缓冲液、三羟甲基甲烷缓冲液；

所述第一试剂的缓冲液和所述第二试剂的缓冲液是相同的或不同的；

所述缓冲液的pH为6.5至8.0；

所述稳定剂选自以下的一种或组合：牛血清白蛋白、海藻糖、甘油、蔗糖、甘露醇、甘氨酸、精氨酸、聚乙二醇6000、聚乙二醇8000；优选牛血清白蛋白；

所述表面活性剂选自以下的一种或组合：Brij23、Brij35、Triton X-100、Triton X-405、Tween20、Tween30、Tween80、椰子油脂肪酸二乙醇酰胺、AEO7，优选Tween20；

所述防腐剂选自以下的一种或组合：叠氮化物、MIT、PC生物防腐剂、硫柳汞；

所述叠氮化物是叠氮钠或叠氮锂；

所述底物包含：6-磷酸葡萄糖、β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸。

10.根据权利要求9所述的妥布霉素检测试剂盒，其包含：

第一试剂，其包含：

100mM至300mM缓冲液、

5mM至25mM底物、

0.01μg/L至1mg/L妥布霉素抗体、

100mM至300mM NaCl、

1g/L至5g/L稳定剂、

1g/L至5g/L表面活性剂、

1g/L至5g/L防腐剂；

第二试剂，其包含：

100mM至300mM缓冲液、

0.05μg/L至0.5mg/L所述偶联物、

1g/L至5g/L稳定剂、

1g/L至5g/L表面活性剂、

1g/L至5g/L防腐剂。