[发明专利]抑制SRPK1的间隔区在制备降低治疗非小细胞肺癌的吉非替尼耐药性的药物中的应用

说明书

本发明公开了抑制SRPK1的间隔区在制备降低治疗非小细胞肺癌的吉非替尼耐药性的药物中的应用，所述SRPK1的间隔区的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明研究SRPK1在NSCLC对gefitinib耐药性中的分子调控机制，基于蛋白相互作用开发一种新型的非激酶活性ATP结合域的SRPK1小分子抑制剂设计靶标，提供SRPK1的间隔区作为药物靶点在抑制wnt信号通路与NSCLC耐药中的治疗新策略。通过抑制SRPK1的间隔区表达，降低wnt途径的GSK3βSer9的磷酸化表达水平和β‑catenin的核内表达，降低NSCLC对gefitinib耐药性，达到治疗NSCLC的效果。

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，具体地，涉及抑制SRPK1的间隔区在制备降低治疗非小细胞肺癌的吉非替尼耐药性的药物中的应用。

背景技术

肺癌是危害人类健康的常见的肿瘤之一，肺癌的死亡率高居恶性肿瘤的首位。非小细胞肺癌(NSCLC)占所有肺癌的80％～85％，是最常见的病理组织类型。肺癌的治疗包括手术切除，放化疗和靶向治疗。即使治疗的手段不断进步，NSCLC患者的5年生存率仍然很低，预后也仍然相对较差。大多数肺腺癌患者在确诊时即为晚期，这类患者的治疗策略主要是化疗和靶向治疗。然而，无论是化疗还是靶向治疗，治疗后30％患者仍会出现不同程度的复发和耐药。因此，肿瘤耐药是NSCLC治疗失败和预后不良的重要原因，为了克服NSCLC的耐药和复发，亟需发展准确、稳定的治疗新靶点，以辅助抵抗NSCLC靶向耐药和复发的风险。50％的晚期NSCLC患者携带表皮生长因子受体(EGFR)突变。携带这类突变的患者肿瘤进展迅速，生存预后差，且往往对传统化疗不敏感。目前，已研发多种药物靶向EGFR的酪氨酸激酶位点的酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)被应用于治疗NSCLC患者进行治疗，如gefitinib等。这些TKIs改善了患者的生存，但80～90％的患者将在10～12年内获得TKIs耐药性导致复发。TKIs的继发性耐药已经成为限制其临床应用和患者生存预后差的关键因素，因此，为了克服及逆转NSCLC对EGFR-TKIs耐受，需要寻找耐药发生后潜在的稳定、特异的新靶点，协同指导临床用药，以提高临床疗效，改善患者预后。

丝/精氨酸蛋白激酶1(SRPK1)及其下游靶点在乳腺癌、结肠癌、胰腺癌和前列腺癌等多种癌症激活机制中发挥关键作用，SRPK1可以作为肿瘤靶向治疗的潜在广谱靶点。目前已研发出少量SRPK1抑制剂，其中SRPIN340是一种SRPK1/2的高选择性异烟酰胺类ATP竞争抑制剂，可通过选择性地抑制SRPK1的活性调节VEGF、FAS、MAP2K1和MAP2K2基因的表达；在黑色素瘤中，注射SRP IN340具有抗肿瘤活性；在小鼠眼血管生成模型中，SRPIN340被发现具有抗血管生成的活性。类似的抑制剂SRPKIN-1与SRPIN803也均被报道能够抑制VEGF的生成，SRPKIN-1具有抑制促血管生成的VEGF-A165a亚型的活性，从而阻断激光诱导的新生血管；SRPIN803由于对CK2和SRPK1的双重抑制作用能更有效地抑制VEGF的产生。此外，腹腔内注射SRPK1抑制剂SPHINX可降低各种前列腺癌、淋巴和髓系白血病、黑色素瘤和色素细胞癌的肿瘤生长。然而，上述传统SRPK1抑制剂主要是针对其激酶的ATP结合域进行设计，细胞内ATP水平常在毫摩尔范围内，ATP竞争性激酶抑制剂能达到的的效力十分有限；其次，长期给药时ATP结合位点极易产生耐药性突变，许多临床批准的ATP竞争性抑制剂中均有耐药突变，如上述所说的NSCLC中EGFR的TKIs耐药突变等。不同于基于ATP结构的激酶抑制剂，肽抑制剂DBS1可阻断SRPK1和SRSF1(富含丝氨酸和精氨酸的剪接因子1)之间的蛋白质-蛋白质相互作用，有效抑制SRSF1的结合和磷酸化，改变VEGF的剪接异构体从而抑制血管生成，但该类口服肽类抑制剂在药物递送方面仍具有很大的挑战性。此外，SRPK1参与NSCLC患者的表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)耐药，目前也尚无相关研究。针对这个问题进行深入、全面的探究，研究SRPK1调控NSCLC耐药的分子机制，进一步寻找SRPK1高选择性的新靶点，对NSCLC耐药的逆转及临床治疗中发挥重要的指导作用。

发明内容